親和柱原理介紹

親和層析（IAC）可稱為色譜技術(shù)，是一種利用抗原特異性可逆結(jié)合特性的SPE技術(shù),根據(jù)抗原的高選擇性,從復(fù)雜的待測樣品中提取目標(biāo)化合物。主要原理是將抗、惰性微珠共價結(jié)合，然后裝入小柱，將被測溶液流過親和柱，而非目標(biāo)化合物則沿柱流下，然后用洗脫緩沖液洗脫抗原（被測物），從而得到純化的抗原（被測物），收集的抗原樣品液可直接用于 HPLC 分析或處理后用熒光光度計檢測。

親和柱介紹

生物分子之間的親和識別包括抗體和抗原、酶和底物和受體等之間的親合作用，這些親和作用屬于生物專一性識別；此外，某些物質(zhì)和生物大分子之間還有一些特異性作用，如染料和某些酶（特別是脫氫酶和激酶等），植物凝集素和糖蛋白，金屬離子和蛋白質(zhì)表面的組氨酸等之間的作用，都可以應(yīng)用于親和分離過程。

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親和柱——特點(diǎn)介紹

1. 回收率好，且速度快：相比市面上常見的瓊脂糖基質(zhì)的肝素親和小柱，納譜分析采用單分散聚酸酯基質(zhì)開發(fā)的肝素親和小柱滴速更快，相同裝量下滴速可以快1~2倍，加快了前處理的時間；

2. 使用輕松，不懼流干：基質(zhì)的機(jī)械強(qiáng)度高、化學(xué)穩(wěn)定性好，即使小柱流干再次潤濕也同樣保證回收率。

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親和柱適用注意事項(xiàng)

(1) 嘔吐毒素對人體有害，應(yīng)戴手套操作。凡接觸到標(biāo)樣的玻璃器皿都要用5%次酸鈉浸泡過夜。

(2) 不要使用過有效期的親和柱。

(3) 親和柱應(yīng)在2~8℃保存。不要冷凍。

(4) 使用前，親和柱需至少提前半小時回溫至室溫(25℃左右)。

(5) HPLC液相測定值、試劑盒計算值接近zui高檢出值時，樣本的實(shí)際含量可能大于柱容量而造成流穿，建議減少上樣體積重新過柱。

(6) 稱取的樣品量以及提取液的體積可根據(jù)實(shí)際情況按比例調(diào)整，建議不少于10g樣。