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顛覆傳統(tǒng)的細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)RCCS-3D三維動態(tài)培養(yǎng)系統(tǒng)
顛覆傳統(tǒng)的細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)RCCS-3D三維動態(tài)培養(yǎng)系統(tǒng)
RCCS 是一種顛覆傳統(tǒng)的三度空間微重力培養(yǎng)系統(tǒng)。其利用培養(yǎng)盤或培養(yǎng)管柱進(jìn)行培養(yǎng),將培養(yǎng)液、細(xì)胞或組織一起加入培養(yǎng)盤或培養(yǎng)管柱中,并去除所有氣泡。培養(yǎng)盤或培養(yǎng)管柱安裝于具旋轉(zhuǎn)馬達(dá)之基座上,內(nèi)部組織、細(xì)胞或細(xì)胞團塊因旋轉(zhuǎn)切線力量及重力雙重影響下而保持懸浮狀態(tài)。隨著細(xì)胞或組織成長,旋轉(zhuǎn)速度可做調(diào)整,細(xì)胞形成團塊之后,必須提高轉(zhuǎn)速使其 不會沉降而碰觸底部。旋轉(zhuǎn)的目的是要讓所有細(xì)胞均勻交換養(yǎng)分和氣體,并且細(xì)胞和細(xì)胞之間可有足夠的接觸,有利于細(xì)胞聚集。另外,不論是培養(yǎng)盤或培養(yǎng)管柱背側(cè)均具備硅膠制成的換氣膜以利進(jìn)行1氣體交換,使細(xì)胞/ 組織得到充分氧氣及排除代謝后的廢氣。
RCCS轉(zhuǎn)壁式生物反應(yīng)器在細(xì)胞增值技術(shù)中的應(yīng)用!
細(xì)胞增殖檢測技術(shù)
目前主要有兩種用于檢測細(xì)胞增殖能力的方法。一種是直接的方法,通過直接測定進(jìn)行分裂
的細(xì)胞數(shù)來評價細(xì)胞的增殖能力。另一種是間接的方法,即細(xì)胞活力(cell viability)檢測方法,通過檢測樣品中健康細(xì)胞的數(shù)目來評價細(xì)胞的增殖能力。顯然,細(xì)胞活力檢測法并不能終證明檢測樣品中的細(xì)胞是否在增殖。如細(xì)胞在某一培養(yǎng)條件下會自發(fā)啟動凋亡程序,但的干擾可抑制凋亡的發(fā)生;這時若采用細(xì)胞活力檢測法,顯然可以區(qū)分兩種條件下的細(xì)胞數(shù)量,但我們并不能從干擾組細(xì)胞數(shù)大于對照組的事實說明可促進(jìn)細(xì)胞增殖的結(jié)論。所以直接的證據(jù)應(yīng)該采用方法一。
其中常見檢測:CCK8檢測法 ,MTT檢測法,Brdu檢測法,Edu檢測法,平板克X隆形成。
RCCS-3D模擬微重力三維動態(tài)培養(yǎng)系統(tǒng)能夠使細(xì)胞貼壁免受機械損傷!
RCCS-3D模擬微重力三維動態(tài)培養(yǎng)系統(tǒng)能夠使細(xì)胞貼壁免受機械損傷。
RCCS-3D旋轉(zhuǎn)三維細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)是一種不同于普通轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)的系統(tǒng)。轉(zhuǎn)瓶包含一個縱軸封瓶以及周圍包裹的彈性塑料壁。在這種情況下,氣體運輸是通過瓶頸。并且,轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)的目的不是三維培養(yǎng),而是二維培養(yǎng)。培養(yǎng)物沿著瓶壁生長,并且,當(dāng)瓶轉(zhuǎn)動,培養(yǎng)物就會與媒介接觸。因此,這兩個系統(tǒng)之間沒有相似性(參見問題1RCCS生物反應(yīng)器的工作原理)。
對培養(yǎng)中的細(xì)胞起到某些保護(hù)作用:有一些細(xì)胞,如內(nèi)皮細(xì)胞、骨1髓樣細(xì)胞可以釋放蛋白酶,血1清中含有抗蛋白酶成分,起到中和作用。這種作用是偶然發(fā)現(xiàn)的,現(xiàn)在則有目的的使用血1清來終止胰蛋白酶的消化作用。因為胰蛋白酶已經(jīng)被廣泛用于貼壁細(xì)胞的消化傳代。血1清蛋白形成了血1清的粘度,可以保護(hù)細(xì)胞免受機械損傷,特別是在懸浮培養(yǎng)攪拌時,粘度起到重要作用。血1清還含有一些微量元素和離子,他們在代謝解1毒中起重要作用,如SeO3,硒等。