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等溫核酸試劑盒
RNA試劑盒使用方法
使用時(shí)一定要根據(jù)自己的實(shí)驗(yàn)需要購(gòu)買提取試劑盒, 如果不是試劑盒,或許能提出RNA,但不能確保其質(zhì)量以及完整性,會(huì)影響RT-PCR、Northern blot、Dot blot、Real time RT PCR、芯片分析、polyA 篩選、體外翻譯、RNase 保護(hù)分析等后續(xù)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果。
當(dāng)前提取效果好的是QIANGEN公司生產(chǎn)的RNA提取試劑盒,但其售價(jià)較高,單次實(shí)驗(yàn)費(fèi)用花費(fèi)太大,對(duì)精度要求不高的實(shí)驗(yàn)沒(méi)有必要購(gòu)買,當(dāng)然還有其它的進(jìn)口試劑盒,但是均存在價(jià)格高、訂貨周期長(zhǎng)的問(wèn)題(如果碰上國(guó)內(nèi)無(wú)貨的時(shí)候,要從國(guó)外發(fā)貨,會(huì)等很長(zhǎng)一段時(shí)間)。普通的提取實(shí)驗(yàn)用國(guó)產(chǎn)的試劑盒就足以,價(jià)格不高,基本上各地均有現(xiàn)貨,如天根(目前國(guó)內(nèi)生產(chǎn)的試劑盒中銷售面比較廣的一種)等,其價(jià)格比進(jìn)口試劑盒要便宜許多,且效果還不錯(cuò),還可以。
當(dāng)然,就RNA的提取而言,不一定試劑盒的提取效果就非常好,其實(shí)采用一些經(jīng)典的RNA提取方法,效果也很不錯(cuò),如:TRIZOL、EDTA等,只是試劑盒使用方便,經(jīng)典的方法操作復(fù)雜一些。
核酸試劑盒
核酸檢測(cè)試劑盒為什么會(huì)出現(xiàn)漏檢?
大家在新聞上看到過(guò)核酸檢測(cè)出現(xiàn)漏檢的現(xiàn)象,這是為什么呢?首先,我們對(duì)病毒認(rèn)識(shí)不足,疾病進(jìn)展目前都不清楚,這就可能導(dǎo)致采樣時(shí)間不合適,從而漏檢。第二,每個(gè)人的抵抗力不同,同樣都有了病毒,但有的人能快速地清除病毒,體內(nèi)病毒量少,自然不易檢出。第三,試劑盒有自身的靈敏度限制,也就是說(shuō)樣本中的病毒量少到一定程度,試劑盒是檢測(cè)不出來(lái)的,這是核酸檢測(cè)技術(shù)上的限制,另外,樣本采集是否規(guī)范、轉(zhuǎn)運(yùn)保存是否恰當(dāng)?shù)纫蛩囟紩?huì)影響試劑盒的陽(yáng)性檢出率。
數(shù)字PCR法和熒光PCR法的關(guān)鍵區(qū)別在于檢測(cè)結(jié)果的定量和相對(duì)定量差異。據(jù)了解,現(xiàn)階段數(shù)字PCR試劑和機(jī)器相價(jià)格加高(一臺(tái)儀器近百萬(wàn)元),在SARS-CoV-2快速檢測(cè)中的優(yōu)勢(shì)并不大。
不過(guò),由于具備自動(dòng)化程度更好、耗時(shí)更短等技術(shù)優(yōu)勢(shì),國(guó)內(nèi)多家掌握了數(shù)字PCR技術(shù)的核酸試劑研發(fā)企業(yè)正在嘗試開(kāi)發(fā)適用于SARS-CoV-2檢測(cè)的相關(guān)試劑盒。