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傳統(tǒng)結(jié)晶板蛋白質(zhì)晶體板比較
在20℃時雖然微流控芯片上的結(jié)晶條件數(shù)少于24孔結(jié)晶板(67 vs 94),但主要是嗜熱菌蛋白酶的結(jié)晶條件數(shù)顯著減少,其他4種蛋白在兩種方法上均有相近的結(jié)晶條件數(shù),表明微流控芯片能以接近24孔結(jié)晶板的效率進(jìn)行蛋白質(zhì)結(jié)晶篩選.但是,在4℃時微流控芯片與24孔結(jié)晶板有60%的結(jié)晶條件不同,20℃時有90%的結(jié)晶條件不同,這表明目前的這種微流控芯片還不能直接代替?zhèn)鹘y(tǒng)的24孔結(jié)晶板,它可以作為蛋白質(zhì)結(jié)晶篩選時的一種補(bǔ)充方式。
蛋白質(zhì)晶體板結(jié)構(gòu)
多肽分子中前一個殘基中羰基碳原子與后一個殘基中的氨基氮原子之間形成一個肽鏈。多肽分子以氨基端為頭,而以羧基端為尾。組成蛋白質(zhì)分子的α-氨基酸都是L-異構(gòu)體,其構(gòu)型見圖2。圖2每個氨基酸或其殘基中羧酸根α位上的碳原子 Cα直接與氫原子、氨基和側(cè)鏈R基相連。在L-異構(gòu)體中,從Cα向R 看 時,按順時針順序排列是H、NH幦和COO。存在于蛋白質(zhì)分子中的20種氨基酸各以其側(cè)鏈R基而相區(qū)別。
蛋白結(jié)晶板使用
在基因組、蛋白質(zhì)組、納米技術(shù)中,結(jié)晶學(xué)是一門關(guān)鍵的科學(xué)。在這些研究領(lǐng)域中,通過X射線進(jìn)行單晶結(jié)構(gòu)分析來探測分子的三維結(jié)構(gòu)是很重要的技術(shù)。其中大分子晶體研究是主要的挑戰(zhàn),GREINER生產(chǎn)一系列的產(chǎn)品來滿足這一應(yīng)用。
有一平臺,平臺中有一個方形平底的結(jié)晶池,用于接收樣品,
每池容量3.9μl池底透明。
標(biāo)準(zhǔn)形板,方形池:96孔,方形孔,孔容量320μl,孔底磨砂不透明.每一孔中設(shè)計
有一平臺,平臺中有三個方形平底的結(jié)晶池,用于接收樣品,每池
容量4.1μl,池底透明.
標(biāo)準(zhǔn)形板,圓形池:96孔,方形孔,孔容量320μl,孔底磨砂不透明.每一孔中設(shè)計有一
平臺,平臺中有三個圓形U底的結(jié)晶池,用于接收樣品,每池容量
蛋白結(jié)晶板
但主要是嗜熱菌蛋白酶的結(jié)晶條件數(shù)顯著減少,其他4種蛋白在兩種方法上均有相近的結(jié)晶條件數(shù),表明微流控芯片能以接近24孔結(jié)晶板的效率進(jìn)行蛋白質(zhì)結(jié)晶篩選.但是,在4℃時微流控芯片與24孔結(jié)晶板有60%的結(jié)晶條件不同,20℃時有90%的結(jié)晶條件不同,這表明目前的這種微流控芯片還不能直接代替?zhèn)鹘y(tǒng)的24孔結(jié)晶板,它可以作為蛋白質(zhì)結(jié)晶篩選時的一種補(bǔ)充方式。
技術(shù)成為目前迅速發(fā)展的前沿領(lǐng)域之一,是化學(xué)科學(xué)和生命科學(xué)分析研究的重要技術(shù)平臺.微流控技術(shù)高通量,低消耗和低成本的特點使其在蛋白質(zhì)結(jié)晶條件篩選和優(yōu)化方面展示了良好的應(yīng)用前景.本文對應(yīng)用于蛋白質(zhì)結(jié)晶的各種微流控芯片技術(shù)的原理和方法進(jìn)行了綜述,并對目前幾種商業(yè)化和文獻(xiàn)報道的典型蛋白質(zhì)結(jié)晶微流控系統(tǒng)進(jìn)行了介紹和比較.