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發(fā)布時間:2021-01-15 20:19  






做親和柱時,使用Sepharose 4B 和 Sepharose CL-4B有何不同?

Sepharose 4B指4%的瓊脂糖

Sepharose CL-4B指4%高度鉸鏈的瓊脂糖

他們的區(qū)別在于鉸鏈程度不一樣,在親和層析色譜中,介質(zhì)鉸鏈程度越高,化學穩(wěn)定性就應該越高。這樣就可以耐受更加苛刻條件洗脫而偶聯(lián)的配基不會脫落。越是硬質(zhì)的介質(zhì),耐受的流速也會越高。這樣更節(jié)省平衡洗脫的時間。



親和柱——親和層析原理

親和層析原理:利用生物分子之間的專一性識別性或特定的相互作用的分離技術稱為親和分離技術。在該技術中,親和分離過程是通過引入親和配基得以實現(xiàn)的。所謂親和配基,是指具有對生物分子專一識別性或特異相互作用的物質(zhì)。將親和配基固定在不同的介質(zhì)上,可得到不同的親合分離技術,如固定在層析介質(zhì)上,達到專一性層析分離的技術稱為親和層析技術。將親和配基接在分離膜上,得到親和膜分離技術。



親和柱——原理介紹

親和柱的功能基于抗原與抗體間可逆的特異性結合反應,使其可從復雜樣品基質(zhì)中特異性地回收目標化合物。上樣后,柱中以共價鍵形式偶聯(lián)在凝膠上的抗體會與抗原(即目標化合物)特異性結合,雜質(zhì)不會被結合,大部分隨樣品溶液流出小柱。通過淋洗的方式除去小柱內(nèi)剩余雜質(zhì)后,使用其他洗脫液(根據(jù)對應產(chǎn)品說明書選擇)進行洗脫即可得到潔凈的目標化合物溶液,可直接用于后續(xù)檢測。




親和柱介紹

目前,專用于黃曲霉毒素分離純化的固相萃取產(chǎn)品有兩類:

一是親和柱(IAC)[sl,它是將特異性的AFT抗體與適當?shù)墓潭ㄏ嘟Y合填柱而成,特異性強,靈敏度較高。

二是多功能凈化柱(MFC)它是一種特殊的SPE柱,以極性、非極性及離子交換等兒類基團組成填充劑,可選擇性吸附樣液中的脂類、蛋白類等雜質(zhì),AFT不被吸附而直接通過,MFC的操作更為簡便,不需要進行活化、淋洗和洗脫操作只需直接上樣,10秒鐘內(nèi)即可完成整個凈化過程,凈化效果理想。




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