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氨基(Tris)是一種,常用于生物實驗中配制各種PH值的緩沖液,同時也是化妝品的原料物質(zhì),因此在一定空間和時間內(nèi)Tris會在環(huán)境中累積,造成外界環(huán)境污染的風(fēng)險。但是Tris在外界環(huán)境中也會被環(huán)境中的細(xì)菌所降解,從而降低它的累積量。只有通過檢測Tris降解特性才能衡量其在環(huán)境中污染的風(fēng)險。有實驗表明,氨基在條件下5d內(nèi)降解百分率超過96%,根據(jù)OECD有機(jī)物快速生物降解性標(biāo)準(zhǔn),氨基屬于可快速生物降解性物質(zhì),對外界環(huán)境的污染風(fēng)險較低。這樣也有助于認(rèn)識其在環(huán)境中的遷移、轉(zhuǎn)化規(guī)律,為其生態(tài)風(fēng)險的評估提供理論依據(jù)。
Tris試劑桶裝,在病毒保存液中,加入Tris首先可以維持采樣樣本的pH值,起到生物緩沖劑的效果,病毒及其核酸對環(huán)境pH是比較敏感的,核酸(DNA、RNA)在酸性溶液中易水解,在中性或弱堿性溶液中較穩(wěn)定。而Tris三羥,PH緩沖范圍:7.0-9.0,能夠維持待提取樣品裂解后釋放的核酸的穩(wěn)定性,以避免核酸的降解,提高核酸的濃度和純度,有利于提高核酸的質(zhì)量,保證后續(xù)核酸檢測分析等操作的準(zhǔn)確性。
20mg/ml蛋白酶K(proteinase K):將200mg的蛋白酶L加入到9.5ml水中,輕輕搖動,直至蛋白酶K完全溶解。不要渦旋混合。加水定容到10ml,然后分裝成小份貯存于-20℃。
10mg/mlRnase(無DNase)(DNase-free RNase):溶解10mg的胰蛋白RNA酶于1ml的10mmol/L的乙酸鈉水溶液中(pH 5.0)。溶解后于水浴中煮沸15min,使DNA酶失活。用1mol/L的Tris-HCl調(diào)pH至7.5,于-20℃貯存。(配制過程中要戴手套)