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三(羥)(TRIS):三羥(TRIS)是一種重要的有機化工原料,廣泛應(yīng)用于生物化學(xué)、分子生物學(xué)、、材料等領(lǐng)域。在生物化學(xué)方面,TRIS用作緩沖液的組分來調(diào)節(jié)體系的pH值;分子生物學(xué)方面,TRIS可以作為一些酶的,用于蛋白的研究;材料方面,TRIS可用于制備一些水溶性涂料的分散劑 ,也可用作空氣凈化器材料的組分; 醫(yī)面, TRIS用于合成磷氨、酮咯酸氨、右旋硫辛酸氨等。
Tris緩沖液不僅被廣泛用作核酸和蛋白質(zhì)的溶劑,還有許多重要用途。Tris被用于不同pH條件下的蛋白質(zhì)晶體生長。Tris緩沖液的低離子強度特點可用于線蟲核纖層蛋白的中間纖維的形成。Tris也是蛋白質(zhì)電泳緩沖液的主要成分之一,其在電泳緩沖液中與甘氨酸構(gòu)成緩沖體系,穩(wěn)定電泳過程中的PH。Tris還是制備表面活性劑、硫化促進劑和一些的中間物。Tris也被用作滴定標(biāo)準(zhǔn)物。 作為蛋白緩沖液時,若后續(xù)工作需要質(zhì)譜,則不適宜用Tris,換成其他質(zhì)譜儀可耐受的緩沖液。
使用緩沖溶液的注意事項:不少緩沖溶液都含有易揮發(fā)組分,如,氨-氯化銨中的氨酷酸-中的醋酸。現(xiàn)在,不少實驗室引入了定量加液器,用定量加液器加試劑,具有簡便準(zhǔn)確誤差恒定的特點,特別是在做成批樣品時更顯出它的優(yōu)越性,不少同志也喜歡用它來加緩沖液,但是,應(yīng)注意緩沖液不能長久存放在定量加液器中,因該器皿不密閉,易造成氨的揮發(fā)(醋酸-緩沖液中的醋酸也同理),從而,導(dǎo)致溶液失效,正確的做法是緩沖液應(yīng)適量配制,使用后及時密閉并置于低溫中保存。
常用貯液與溶液
1mol/L亞精胺(Spermidine): 溶解2.55g亞精胺于足量的水中,使終體積為10ml。分裝成小份貯存于-20℃。
1mol/L精胺(Spermine):溶解3.48g精胺于足量的水中,使終體積為10ml。分裝成小份貯存于-20℃。
10mol/L乙酸胺(ammonium acetate):將77.1g乙酸胺溶解于水中,加水定容至1L后,用0.22um孔徑的濾膜過濾。