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洋蔥亞細(xì)胞定位培養(yǎng)電話「思特進(jìn)」

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發(fā)布時間:2021-04-29 16:04  






武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實驗技術(shù)研發(fā)、實驗產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實驗項目承接為一體的高新技術(shù)公司;采用遺傳轉(zhuǎn)化技術(shù)獲得了整合有擬南芥AtELHYPRP2(EARLI1-LIKEHYBRIDPROLINE-RICHPROTEIN2,AT4G12500)基因的轉(zhuǎn)基因株系,研究了該基因編碼蛋白對真菌病原體赤霉菌的抗性及其亞細(xì)胞定位特征。公司實驗中心有分子生物學(xué)平臺、細(xì)胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達(dá)平臺、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺;可以開展各類動、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實驗。




分別用70%乙醇和滅菌蒸餾水清洗金粉(直徑為1 μm),加入滅菌蒸餾水制成金粉懸浮液,取100 μL 放在含有1.0 cm2 洋蔥表皮的玻璃皿中,邊振蕩邊加入10 μL pCambia2301-GaMYB2-GFP質(zhì)粒,逐步加入40 μL 0.1 mol·L-1 亞精胺和100 μL2.5 mol·L-1 CaCl2,振蕩混勻?;驑孏DS-80轟擊時氦氣罐的氣壓為1 300 psi,取10 μL DNA 包裹好的微粒懸浮液加到基因槍中央,進(jìn)行轟擊,之后放置25℃避光過夜培養(yǎng),使用ConfocalLaser激光共聚焦顯微鏡觀察?;ㄉ?anthocyanins)是一種重要的天然水溶性色素,廣泛存在于植物的根、莖、葉、花、果實等的細(xì)胞液中,從而使其呈現(xiàn)出紅色、蘭色或紫色等顏色。


武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實驗技術(shù)研發(fā)、實驗產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實驗項目承接為一體的高新技術(shù)公司;GFP,實際是給你要研究的物質(zhì)加上標(biāo)記,在此相當(dāng)于報告蛋白的作用。公司實驗中心有分子生物學(xué)平臺、細(xì)胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達(dá)平臺、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺;可以開展各類動、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實驗。





洋蔥(Allium cepa L.)屬百合科蔥屬,是世界主栽蔬菜之一,也是我國主要的出口蔬菜之一。FT(FLOWERING LOCUS T)基因是開花植物光周期反應(yīng)過程中調(diào)控植物成花的關(guān)鍵基因,也是重要的開花整合因子。實驗室在前期工作中已經(jīng)成功了洋蔥的開花素類似基因Ac FT1及Ac LFT,為確定其功能,本試驗分別構(gòu)建了Ac FT1及Ac LFT的正義、反義和RNAi干擾的植物表達(dá)載體,通過凍融法導(dǎo)入到根癌農(nóng)EHA105中,進(jìn)而通過花序侵染法轉(zhuǎn)入模式植物擬南芥中。能抑制細(xì)胞分裂,誘導(dǎo)微核形成,導(dǎo)致部分細(xì)胞,但的毒性作用機(jī)制不是很清楚。通過熒光定量PCR法測定Ac FT1及Ac LFT在擬南芥抽薹前葉片中的相對表達(dá)含量,觀察轉(zhuǎn)化植株的形態(tài)學(xué)指標(biāo),繼而確定Ac FT1及Ac LFT在洋蔥成花中的作用,為實現(xiàn)洋蔥抽薹開花的基因調(diào)控提供參考。試驗結(jié)果歸納如下:⑴構(gòu)建了Ac FT1的正義植物表達(dá)載體p Z-Ac FT1,反義植物表達(dá)載體p R-AcFT1,RNAi植物表達(dá)載體p RNAi-Ac FT1;構(gòu)建了AcLFT的正義植物表達(dá)載體p Z-AcLFT,反義植物表達(dá)載體p R-Ac LFT,RNAi植物表達(dá)載體p RNAi-Ac LFT.;⑵利用凍融法將重組質(zhì)粒p Z-Ac FT1、p R-Ac FT1、p RNAi-Ac FT1、p Z-Ac LFT、p R-Ac LFT、p RNAi-Ac LFT導(dǎo)入根癌農(nóng)EHA105中,利用花序侵染法對擬南芥進(jìn)行轉(zhuǎn)化。


武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實驗技術(shù)研發(fā)、實驗產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實驗項目承接為一體的高新技術(shù)公司;泛素-蛋白酶體通路在植物防衛(wèi)反應(yīng)(包括反應(yīng))中發(fā)揮重要作用,泛素連接酶(ubiquitinligase,E3)則是參與這一過程的重要組分。公司實驗中心有分子生物學(xué)平臺、細(xì)胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達(dá)平臺、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺;可以開展各類動、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實驗。




盾葉薯蕷(Dioscorea zingiberensis C.H.Wrigh t),是我國特有的甾體類藥源植物,也是世界上薯蕷皂甙元含量的資源植物。近些年,由于人類的過度采挖,野1生盾葉薯蕷資源瀕臨枯竭,而人工栽培種存在皂甙元含量降低,種質(zhì)退化等問題。細(xì)胞和基因工程技術(shù)可望為盾葉薯蕷的品種改良提供一個新的途徑。其保守的WRKY結(jié)構(gòu)域能與下游基因啟動子W-box特異性結(jié)合,從而調(diào)控下游基因的表達(dá)水平。本實驗篩選了盾葉薯蕷易組織培養(yǎng)的基因型,并以其三種外植體—幼胚誘導(dǎo)的胚性愈傷,花序愈傷和花序作為轉(zhuǎn)化受體,研究了根癌農(nóng)介導(dǎo)的盾葉薯蕷轉(zhuǎn)化的各種影響因素,獲得了轉(zhuǎn)基因植株,初步建立了根癌農(nóng)介導(dǎo)的盾葉薯蕷轉(zhuǎn)化體系,為通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)對其進(jìn)行品種改良的研究奠定了技術(shù)基礎(chǔ)。


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