固相萃取柱的正確使用步驟是什么呢？

一、參考固相萃取柱的類型及應(yīng)用，選擇適當?shù)奶盍项愋?，然后選擇固相萃取柱的大小和填料量。

反相、正相和吸附類型的過程：被萃取樣品的質(zhì)量不超過柱中填料量的5%，也就是說，如果您用100毫克/1ml的固相萃取柱，分析物質(zhì)不超過5毫克。

離子交換過程：您必須考慮離子交換的容量：SAX和SCX其吸附劑容量為0。2毫當量/克。

第二、選擇好萃取柱后，按步驟進行萃取過程：正相類型固相萃取硅膠和極性吸附劑介質(zhì)，通常用樣品所在的溶劑來預處理。離子交換填料將用于非極性溶劑中的樣品，其用3-5ml的去離子水或低濃度的離子緩沖溶液來預處理。為了使固相萃取填料從預處理到樣品加入時都保持濕潤，允許大約1毫升的預處理溶劑在管過濾片（frit）或萃取片表面之上。如果樣品是從一個貯液管或過濾管引入固相萃取管，則多加入0。5毫升的預處理溶劑到1毫升的固相萃取管中，如果是2毫升到3毫升的萃取柱中，多加入4升到6毫升管中等等。這是為了保證在樣品加入之前萃取柱濕潤。如果在樣品加入之前，萃取柱中的填料干了，重復預處理過程。在重新引入溶劑之前，用水沖洗柱中緩沖溶液的鹽。

固相萃取柱的使用步驟

步驟一：預處理萃取柱。

在萃取樣品之前，為了濕潤固相萃取柱填料，用一滿管溶劑沖洗管子。反相類型硅膠和非極性吸附劑介質(zhì)，通常用水溶性溶劑預處理，然后用水或緩沖溶液。濕潤吸附劑表面和滲透鍵合烷，以允許水更有效地濕潤硅膠表面。有時前預處理溶劑使用之前。這些溶劑通常是與洗脫溶劑一樣，是用之消除固相萃取管上的雜質(zhì)及其對分析物的干擾，也可能該雜質(zhì)只溶于強洗脫溶劑。

步驟二：加入樣品。

將樣品裝入萃取柱，此時，固相萃取小柱中的填料會吸附樣品中所感興趣的化合物或者樣品中的雜質(zhì)。這樣，當樣品流出時，所選擇的化合物（包括雜質(zhì)）被留在萃取柱上。

步驟三：沖洗填料。

用一種強得能洗脫雜質(zhì)而又弱得能保留感興趣的化合物的沖洗液來沖洗雜質(zhì)。

步驟四：洗脫感興趣的化合物。

用溶劑將被吸附在萃取柱上的化合物洗脫在溶液里。

固相萃取柱淋洗系統(tǒng)怎么選擇

固相萃取SPE(Solide Phase Extraction) 是利用吸附劑將液體樣品中的目標化合物吸附,與樣品的基質(zhì)和干擾化合物分離,然后再用洗脫液洗脫,達到分離或者富集目標化合物的目的。固相萃取實際上采用的是液相色譜的分離原理,分離模式主要包括反相、正相、離子交換和吸附。固相萃取所用的吸附劑與液相色譜常用的固定相相同,只是在填料的形狀和粒徑上有所區(qū)別。一般來講,固相萃取填料的粒徑分布較液相色譜柱中的要寬,而且固相萃取小柱是一次性消耗品。
　　固相萃取小柱的吸附劑通常裝填于聚烯柱筒底部,并由上下兩層聚烯或聚四氟乙烯篩板固定;也有96 孔形式的固相萃取小柱。固相萃取小柱的大小規(guī)格、吸附劑的種類及裝量都配有多種選擇。

固相萃取柱回收率低的原因及解決方法

固相萃取柱回收率低：

（1）可能原因：清洗溶劑選擇不當；洗脫能力太強

解決方法：使用正確的清洗溶劑；選擇洗脫能更弱的溶劑

（2）可能原因：載樣時流速過快

解決方法：重力自然載樣或控制載樣流速≤1mL/min

（3）可能原因：SPE小柱太小

解決方法：?用更大規(guī)格的SPE小柱?用選擇性更強的SPE小柱?用載樣量更大的SPE小柱

（4）可能原因：洗脫前SPE小柱清洗溶劑抽干不充分

解決方法：充分抽干沖洗溶劑

（5）可能原因：洗脫不充分

解決方法：增加洗脫劑的體積，增加洗脫劑的強度；用更小規(guī)格的SPE小柱

（6）可能原因：洗脫時流速過快或過慢

解決方法：控制流速1～2ml/min