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標(biāo)定：取在105℃干燥至恒重的基準(zhǔn)鄰二甲酸氫鉀約0.16g，精密稱定，加無水冰醋酸20mL使溶解，加結(jié)晶紫指示液1滴，用本液緩緩滴定至藍(lán)色，并將滴定的結(jié)果用空白試驗校正。每1mL滴定液（0.1mol/L）相當(dāng)于20.42mg的鄰二甲酸氫鉀。微生物生成檸檬酸要求低pH，最適pH為2～4，這不僅有利于生成檸檬酸，減少草酸等雜酸的形成，同時可避免雜菌的污染。根據(jù)本液的消耗量與鄰二甲酸氫鉀的取用量，算出本液的濃度，即可。

1893年C.韋默爾發(fā)現(xiàn)青霉（屬）菌能積累檸檬酸。1913年B.扎霍斯基報道黑曲霉能生成檸檬酸。英軒檸檬酸/食品級檸檬酸/檸檬酸價格/檸檬酸銷售/沈陽恒之盛中國用發(fā)酵法制取檸檬酸以1942年湯騰漢等報告為最早。1916年湯姆和柯里以曲霉屬菌進(jìn)行試驗，證實大多數(shù)曲霉菌如泡盛曲霉、米曲霉、溫氏曲霉、綠色木霉和黑曲霉都具有產(chǎn)檸檬酸的能力，而黑曲霉的產(chǎn)酸能力更強。

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　檸檬酸別稱枸緣酸，化學(xué)名稱2-羥基丙烷-1,2,3-三羧酸。根據(jù)其含水量的不同，分為一水檸檬酸和無水檸檬酸。檸檬酸的用途非常廣泛,用于食品工業(yè)占生產(chǎn)量的75%以上,可做為食品的酸味劑,pH調(diào)節(jié)劑,用于清涼飲料和果醬以及糕點等食品中。用于工業(yè)占10%左右,主要用作劑和解酸藥以及化妝品等。1970年，天津、上海、沈陽、常州等地研究單位利用解脂假絲酵母（candidalipolytica)進(jìn)行石蠟油（正構(gòu)烷烴）發(fā)酵生產(chǎn)檸檬酸的試驗。用于化學(xué)工業(yè)等占15%左右,用作緩沖劑和絡(luò)合劑以及調(diào)色劑等。在電子，紡織和石油以及陶瓷等工業(yè)領(lǐng)域中都有十分廣闊。