高架十字迷宮試驗(yàn) ：

EPM ) 既可以建立焦躁應(yīng)激的模型也是國際上公認(rèn)的經(jīng)典測(cè)量焦躁反應(yīng)的方法。其原理是利用動(dòng)物對(duì)新異環(huán)境的探究特性和對(duì)高懸敞開臂的恐 懼心理, 形成動(dòng)物的矛盾沖突來考察大鼠的焦躁?duì)顟B(tài)。 EPM 測(cè)試的項(xiàng)目中, 焦躁動(dòng)物的 OE% 和 OT% 會(huì)明顯降低, 經(jīng)典抗焦躁藥則使兩者升高, OE CE 反映了動(dòng)物的運(yùn)動(dòng)活性。本研究發(fā)現(xiàn)模型組大鼠的 OE% 和 OT% 顯著下降, 運(yùn)動(dòng)活性也降低。HD反映了動(dòng)物在非保護(hù)區(qū)內(nèi)的探索行為, 代表動(dòng)物對(duì)陌生環(huán)境的好奇探究或因恐懼而尋求逃避, 與焦躁程度有一定相關(guān)性, 本研究中空瓶應(yīng)激后的大鼠 HD行為減少; RR可用來觀察藥有無鎮(zhèn)靜作用及鎮(zhèn)靜強(qiáng)度。上述結(jié)果證實(shí), 慢性應(yīng)激后的大鼠明顯處于焦躁?duì)顟B(tài), 說明慢性焦躁應(yīng)激大鼠模型的制備成功, 且通過量化的標(biāo)準(zhǔn)客觀反映出大鼠的焦l慮程度。

灌注固定主要用于神經(jīng)系統(tǒng)，其他組織意義不是很大，而且耗時(shí)耗力。對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)防止變性效果較好！

小鼠灌注

灌流固定小鼠時(shí)一般采用輸液器的針頭 (4 號(hào)半，這樣肉眼可見就是肺部明顯充氣脹大變白，針頭要從心軸方向進(jìn)針，然后刺入心尖 3~4 毫米左右就可以了，開始灌流后剪破右心耳，約 40 毫升生理鹽水，后再灌流約 20 毫升多聚甲醛，整個(gè)灌流固定的過程就完成了。

注意事項(xiàng)

1. 針頭大小與動(dòng)物的種類有關(guān)，t 同時(shí)針頭一定要磨鈍。

2. 檢查灌注泵的運(yùn)作情況，一定排出管子的氣泡和空氣，防止空氣栓塞。

3. 經(jīng)腹腔暴腔，先清楚升主動(dòng)脈外面的脂肪組織和心外膜組織。

4. 將針頭經(jīng)左心室插入升主動(dòng)脈（顏色變白的哦），并用鉗子固定。

5. 解開右心耳，同時(shí)開啟灌注泵。注意，不要隨便揭開心臟的其他部位，否則有時(shí)候可能會(huì)灌注成功但是絕大部分會(huì)造成灌注不成功，尤其。

6. 將 4 度的生理鹽水（好已動(dòng)物的發(fā)白為標(biāo)準(zhǔn)，我們實(shí)驗(yàn)室的大鼠約用 250ml）和多聚甲醛 (根據(jù)所取得材料而定) 依次灌入。

7. 整個(gè)過程均應(yīng)將動(dòng)物放在冰上，以便于更好地保存目的蛋白和酶的活性。