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親和柱的區(qū)別
北京中檢維康生物技術(shù)有限公司——專業(yè)親和柱供應(yīng)商,我們?yōu)槟鷰硪韵滦畔ⅰ?
1ml親和柱和3ml親和柱的區(qū)別很明顯就是兩者的柱體積不一樣。
當然親和柱有很多的種類,比如鎳螯合柱,蛋白A柱等等。
假設(shè)是同一種填料的親和柱,那么1ml親和柱和3ml親和柱的區(qū)別就是,1ml柱里面裝載了1ml體積的填料,而3ml柱里面裝載了3ml的填料。
體積越大,能親和吸附的樣品就越多。
親和柱的應(yīng)用
應(yīng)用:牛奶中黃曲霉毒素M1的測定
(參考方法GB 541337-2010 食品安全國家標準 乳和乳制品中黃曲霉毒素M1 的測定)
樣品前處理
稱取50g牛奶到具塞離心管中,在水浴中加熱到35-37℃,4000轉(zhuǎn)離心15min,除去上層乳脂,全部樣品待過柱凈化
樣品過柱凈化
1. 將親和柱(SBHL-20-0245)連接于10ml或50ml注射管下。
2. 將處理好的樣品全部通過親和柱,控制試樣以2mL/min-3mL/min穩(wěn)定的流速過柱。(注意:空氣不能通過柱體)
3. 以穩(wěn)定的流速淋洗柱子兩次,棄去全部流出液,并使2mL-3mL空氣通過柱體。
4. 洗脫,流速為1mL/min-2mL/min,收集全部洗脫液于玻璃試管中,供檢測用。
親和柱——特點介紹
親和柱,相對于多功能凈化柱特異性強,靈敏度較高;多功能凈化柱就相對使用方便,無需洗脫,比較適合簡單樣品的樣品純化。
親和柱主要特點如下:
? 可用于黃曲霉毒素,嘔吐毒素,付馬毒素,赭曲霉毒素和玉米赤霉烯酮的檢測
親和柱——親和層析的應(yīng)用
抗原和抗體利用抗原、抗體之間高特異的親和力而進行分離的方法又稱為親和層析。例如將抗原結(jié)合于親和層析基質(zhì)上,就可以從中分離其對應(yīng)的抗體。在蛋白質(zhì)工程菌發(fā)酵液中所需蛋白質(zhì)的濃度通常較低,用離子交換、凝膠過濾等方法都難于進行分離,而親和層析則是一種非常有效的方法。將所需蛋白質(zhì)作為抗原,經(jīng)動物后制備抗體,將抗體與適當基質(zhì)偶聯(lián)形成親和吸附劑,就可以對發(fā)酵液中的所需蛋白質(zhì)進行分離純化??乖?、抗體間親和力一般比較強,其解離常數(shù)為108-10?12M,所以洗脫時是比較困難的,通常需要較強烈的洗脫條件。可以采取適當?shù)姆椒ㄈ绺淖兛乖?、抗體種類或使用類似物等來降低二者的親和力,以便于洗脫。
另外金黃色球菌蛋白A(ProteinA)能夠與球蛋白G(IgG)結(jié)合,可以用于分離各種IgG。