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ELISA試劑盒的用途
ELISA的基礎(chǔ)是抗原或的固相化及抗原或的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或仍保持其活性,酶標(biāo)記的抗原或既保留其活性,又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí),受檢標(biāo)本(測(cè)定其中的或抗原)與固相載體表面的抗原或起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開(kāi)。再加入酶標(biāo)記的抗原或,也通過(guò)反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了反應(yīng)的結(jié)果,使測(cè)定方法達(dá)到很高的敏感度。 ELISA可用于測(cè)定抗原,也可用于測(cè)定。
然而,影響Elisa試驗(yàn)結(jié)果的因素很多,故加強(qiáng)各個(gè)環(huán)節(jié)的質(zhì)量保證才能充分發(fā)揮其方法學(xué)的優(yōu)點(diǎn)。
ELISA試劑盒的制備方法
包括以下步驟:
1)抗原表位的計(jì)算機(jī)篩選;
2)抗原的制備;
3)采集;
4)間接ELISA方法的建立;
5)間接ELISA方法的敏感性和特異性驗(yàn)證;
6)試劑盒的穩(wěn)定性驗(yàn)證;
7)對(duì)屠宰場(chǎng)進(jìn)行臨床檢測(cè)。該方法簡(jiǎn)單、快速、靈敏度高、特異性強(qiáng)、穩(wěn)定性合格、重復(fù)性好。應(yīng)用本發(fā)明制得的試劑盒能有效檢出戊型病毒,適用于大批量發(fā)病樣本的檢測(cè),可用于豬戊肝的快速診斷,并預(yù)防、控制豬戊病毒的流行和阻斷戊病毒由豬向人傳播。
Elisa試劑盒原理及用途
本試劑盒采用間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA方法檢測(cè)肌肉組織、牛奶等樣品中的米松(Dexamethasone,DEX),試劑盒由預(yù)包被偶聯(lián)抗原的酶標(biāo)板、酶標(biāo)記物、、標(biāo)準(zhǔn)品及其他配套試劑組成。檢測(cè)時(shí),加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品溶液,樣本中的米松藥品和酶標(biāo)板上預(yù)包被偶聯(lián)抗原競(jìng)爭(zhēng)抗米松藥類(lèi),加入酶標(biāo)記物后,用TMB底物顯色,樣本吸光度值與其所含米松藥品含量成負(fù)相關(guān),與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較即可得出樣本中米松藥品的殘留量。
Elisa試劑盒的安全性
8. 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
2. 洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
3. 底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
4. 加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
5. 按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。