你對(duì)制備色譜陌生嗎？還不進(jìn)來(lái)看看它的特點(diǎn)

很多初接觸色譜領(lǐng)域的朋友對(duì)制備色譜這個(gè)名詞比較陌生。其實(shí)，在化學(xué)化工醫(yī)學(xué)等廣泛采用的層析法以及薄層色譜就是較為典型的制備色譜，換句話說(shuō)，將分析色譜的進(jìn)樣量增大，同時(shí)得出大量的所需物質(zhì)（餾分）的過(guò)程就可以稱為制備色譜。分析色譜的目的，是分析出混合物中一個(gè)（或者幾個(gè)）純物質(zhì)的含量。制備色譜的目的，是從混合物中得到純物質(zhì)。而制備色譜系統(tǒng)則是利用制備色譜的思想能得到純化物質(zhì)的多個(gè)分析測(cè)試設(shè)備聯(lián)用的總稱。     分析色譜是制備色譜的基礎(chǔ)。當(dāng)我們?cè)诜治錾V上取得了良好的分離效果時(shí)，可以將其放大，應(yīng)用到制備色譜上，由此，我們需要考慮調(diào)整上樣量，流速，梯度：     

1.上樣量的調(diào)整：     他與分析色譜柱和制備色譜柱的柱長(zhǎng)和柱內(nèi)徑有關(guān)：     

具體關(guān)系時(shí)；制備柱上樣量/分析柱上樣量=制備柱長(zhǎng)/分析柱長(zhǎng)*制備柱內(nèi)徑的平方/分析柱內(nèi)徑的平方；     

2.流速的調(diào)整：     

制備柱流速/分析柱流速=制備柱體積/分析柱體積=制備柱長(zhǎng)/分析柱長(zhǎng)制備柱內(nèi)徑的平方/分析柱內(nèi)徑的平方；     

3.梯度的調(diào)整：     

制備柱梯度/分析柱梯度=制備柱體積/分析柱體積*制備柱流速/分析柱流速；

液相色譜儀應(yīng)用范圍

它的應(yīng)用范圍比較大，而且有不斷拓展的趨勢(shì)。制備純化樣品是它的基礎(chǔ)功能，通過(guò)色譜分離，樣品中目標(biāo)物質(zhì)被分離出來(lái)有待進(jìn)一步研究，比如分離水樣中有機(jī)物、食品中以備分析等。然后是天然成分研究，有助于中藥學(xué)的發(fā)展。分析前人留下的珍貴藥典，通過(guò)藥性研究造福人類。提高產(chǎn)品質(zhì)量，以提高它的價(jià)值和效用，比如純化藥品、純化蛋白質(zhì)制品等。還有一個(gè)方向是用于產(chǎn)品合成的研究，通過(guò)獲得一些純度較高的化合物將以促進(jìn)合成實(shí)驗(yàn)的進(jìn)行。

液相色譜的應(yīng)用

(1)分離混合物液相色譜法只要求樣品能制成溶液，不受樣品揮發(fā)性的限制，流動(dòng)相可選擇的范圍寬，固定相的種類繁多，因而可以分離熱不穩(wěn)定和非揮發(fā)性的、離解的和非離解的以及各種分子量范圍的物質(zhì)。通過(guò)與試樣預(yù)處理技術(shù)相配合，液相色譜法所達(dá)到的高分辨率和高靈敏度，可分離并同時(shí)測(cè)定性質(zhì)上十分相近的物質(zhì)，能夠分離復(fù)雜混合物中的微量成分。并且隨著固定相的發(fā)展，還可在充分保持生化物質(zhì)活性的條件下完成對(duì)其的分離。

(2)生化分析由于液相色譜法具有高分辨率、高靈敏度、速度快、色譜柱可反復(fù)利用，流出組分易收集等優(yōu)點(diǎn)，因而被廣泛應(yīng)用到生物化學(xué)、食品分析、藥的研究、環(huán)境分析、無(wú)機(jī)分析等各種領(lǐng)域，并已成為解決生化分析問(wèn)題有前途的方法。

(3)儀器聯(lián)用液相色譜儀與結(jié)構(gòu)儀器的聯(lián)用是一個(gè)重要的發(fā)展方向。液相色譜一質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)受到普遍重視，如分析氨基甲酸酯多核芳烴等：液相色譜一紅外光譜聯(lián)用也發(fā)展很快，如在環(huán)境污染分析測(cè)定水中的烴類等．使環(huán)境污染分析得到新的發(fā)展。

液相色譜儀分類

      液相色譜儀依據(jù)樣品在固定相和流動(dòng)相分離過(guò)程的物理化學(xué)原理，可分為以下五種。

　　1、吸附色譜：

　　用固體吸附劑作固定相，以不同極性溶劑作流動(dòng)相，依據(jù)樣品中各組分在吸附劑上吸附性能的差別來(lái)實(shí)現(xiàn)分離。

　　2、分配色譜：

　　用載帶在固相基體上的固定液作固定相，以不同極性溶質(zhì)作流動(dòng)相，依據(jù)樣品中各組分在固定液上分配性能的差別來(lái)實(shí)現(xiàn)分離。根據(jù)固定相和液體流動(dòng)相相對(duì)極性的差別，又可分為正相分配色譜和反相分配色譜。當(dāng)固定相的極性大于流動(dòng)相的極性時(shí)，可稱為正相分配色譜或簡(jiǎn)稱正相色譜;若固定相的極性小于流動(dòng)相的極性時(shí)，可稱為反相分配色譜或簡(jiǎn)稱反相色譜。

3、離子色譜：

　　用微粒離子交換劑作固定相，以具有一定pH值的緩沖溶液作流動(dòng)相，依據(jù)離子型化合物中各離子組分與離子交換劑上表面帶電荷基團(tuán)進(jìn)行可逆性離子交換能力的差別而實(shí)現(xiàn)分離。

　　4、體積排阻色譜：

　　用化學(xué)惰性的多孔性凝膠作固定相，按固定相對(duì)樣品中各組分分子體積排阻滯作用的差別來(lái)實(shí)現(xiàn)分離。以水溶液作流動(dòng)相的體積排阻色譜柱，稱為凝膠過(guò)濾色譜;以有作流動(dòng)相的體積排阻色譜法，稱為凝膠滲透色譜法。

　　5、親和色譜：

　　以在不同基體上，鍵合多種不同特性的配位體作固定相，用具有不同pH值的緩沖溶液作流動(dòng)相，依據(jù)生物分子與基體上鍵聯(lián)的配位體之間存在特異性親和作用能力的差別，而實(shí)現(xiàn)對(duì)具有生物活性的生物分子的分離。