高效液相色譜儀的使用保養(yǎng)以及故障處理--使用試管的問題

1、試管的潔凈問題。

高效液相色譜分析法是一個(gè)很靈敏的分析方法，如果因使用不潔凈的試管，便會(huì)影響試驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。例如，在用甲醇作溶劑來溶解樣品時(shí)，所用的小試管是用橡膠塞來做蓋子的，因此，在每次進(jìn)樣時(shí)，都有一個(gè)保留時(shí)間固定的干擾峰存在，后經(jīng)證實(shí)，此干擾峰是由甲醇浸泡橡膠塞而溶下的組分所產(chǎn)生，換用玻璃試管后，干擾峰消除。

2、塑料試管的溶解問題。

近年來，一次性塑料試管給試驗(yàn)人員帶來了極大的方便，但是，在使用過程中一定要注意有機(jī)的溶劑對(duì)試管的溶解現(xiàn)象，在利用此種試管提取樣品時(shí)，有些有的溶劑對(duì)管壁有溶解現(xiàn)象，這些被溶解下來的物質(zhì)有時(shí)也能在檢測器上產(chǎn)生信號(hào)，從而干擾樣品的測定。這時(shí)，可用相同的實(shí)驗(yàn)條件先試驗(yàn)一下，看看不含被抽提物時(shí)，提取液在檢測器上能否產(chǎn)生干擾信號(hào)，如確有干擾信號(hào)存在，就只能換用耐有機(jī)的溶劑的玻璃試管了。

3、被測樣品在試管壁上的吸附問題。

高效液相色譜儀-色譜柱的使用和保養(yǎng) 

色譜柱是高效液相色譜儀主要的部件，被測物質(zhì)能否被很好的分離和測定，色譜柱的性能起著決定性的作用。因此，在日常工作中，應(yīng)特別注意色譜柱的正確使用和維修保養(yǎng)，以延長色譜柱的使用壽命。

1、使用預(yù)柱和保護(hù)柱。

預(yù)柱(pre-column)安裝于泵和進(jìn)樣器之間，它給色譜柱中的流動(dòng)相提供了完全的平衡，并防止了對(duì)柱填料有破壞作用的組分或污染物進(jìn)入色譜柱。保護(hù)柱(guard column)可以阻擋能夠牢固地吸附于色譜柱上的組分進(jìn)入色譜柱，保護(hù)柱應(yīng)與色譜柱的填料相同。預(yù)柱和保護(hù)柱可以經(jīng)常更換，而不需要經(jīng)常更換色譜柱，這就延長了色譜柱的使用壽命。

2、防止氣體進(jìn)入色譜柱。

有些色譜柱(如凝膠柱)是不允許氣泡進(jìn)入的，否則將會(huì)使柱效降低甚至形成微小的難以驅(qū)除的氣室。因此，為了防止氣泡進(jìn)入色譜柱，一定要使用經(jīng)過脫氣的流動(dòng)相，并且要嚴(yán)格按照下列步驟來安裝色譜柱。a.拆卸下色譜柱入口處的密封螺絲，觀察是否有溶劑滲出；b.如有溶劑滲出，即可將色譜柱接到管路上，以避免氣泡的進(jìn)入；c.如無溶劑滲出時(shí)，表明色譜柱的此端已經(jīng)進(jìn)去空氣了，此時(shí)，可將色譜柱的出口端接到進(jìn)樣閥上，以流動(dòng)相來反方向沖洗色譜柱，以便將柱內(nèi)的空氣排除。以0.2ml/min的小流量來沖色譜柱，如果溶劑的流速太快或者是壓力突然的上升都將會(huì)導(dǎo)致柱性能的降低；d.如果流出的溶劑里不含有氣泡，說明柱內(nèi)的氣體已經(jīng)被排出了，再將色譜柱以正確的方向接好，這樣氣泡就進(jìn)不到色譜柱里面了。

3、色譜柱的清洗。

為了不使被測物質(zhì)和雜質(zhì)停留在色譜柱中，在每次的樣品分析工作完成之后，都應(yīng)及時(shí)地清洗色譜柱。

4、色譜柱的存放。

  液相色譜

   液相色譜（HPLC）法是以高壓下的液體為流動(dòng)相，并采用顆粒極細(xì)的高效固定相的柱色譜分離技術(shù)。 　　液相色譜對(duì)樣品的適用性廣，不受分析對(duì)象揮發(fā)性和熱穩(wěn)定性的限制，因而彌補(bǔ)了氣相色譜法的不足。在目前已知的有機(jī)化合物中，可用氣相色譜分析的約占20%，而80%則需用高效液相色譜來分析。液相色譜和氣相色譜在基本理論方面沒有顯著不同，它們之間的重大差別在于作為流動(dòng)相的液體與氣體之間的性質(zhì)的差別。

高效液相色譜-儀器使用中應(yīng)注意的幾個(gè)問題

1、測量值S較佳的位置（即能量很強(qiáng)）調(diào)節(jié)：用手按住測量值鍵，逆時(shí)針方向調(diào)節(jié)至所需要的工作波長，記下顯示的數(shù)值大小。然后再順時(shí)針方向調(diào)至所需要的一個(gè)工作波長，記下顯示的數(shù)值大小。記住顯示數(shù)值大的那個(gè)調(diào)節(jié)方向，在今后工作中改變波長即可選用此種方式，這樣能量較強(qiáng)，波長較準(zhǔn)。這是因?yàn)閭鲃?dòng)機(jī)構(gòu)機(jī)械加工組裝差別引起不一致性，所以需要找出方向。

2、紫外檢測器不要頻繁的開機(jī)、關(guān)機(jī)。