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武漢遠(yuǎn)大弘元股份有限公司以氨基酸及其衍生物的研發(fā)、生產(chǎn)為基礎(chǔ),以武漢大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院和湖北省氨基酸工程技術(shù)研究中心的成果為依托,為客戶提供的產(chǎn)品。
細(xì)胞骨架主要有微管、微絲和中間纖維三種成分,其中微絲在細(xì)胞形態(tài)維持、細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)、細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)運(yùn)輸?shù)燃?xì)胞內(nèi)重要生命活動(dòng)中發(fā)揮作用。微絲主要由Actin通過(guò)聚合形成,Actin高度保守,是一類可以結(jié)合并水解ATP的蛋白質(zhì),β-Actin蛋白質(zhì)第73位組氨酸甲0基化于五十多年前就被發(fā)現(xiàn)在絕大多數(shù)真核細(xì)胞中廣泛存在,并通過(guò)Actin水解ATP后延遲釋放ADP,來(lái)調(diào)控微絲聚合及功能。高半胱氨酸的額外亞使硫醇基更接近羧基,令它能起動(dòng)化學(xué)反應(yīng)形成一個(gè)五元環(huán),稱為高半胱氨酸硫內(nèi)酯。
目前,我國(guó)生產(chǎn)L-胱氨酸和L-半胱氨酸的技術(shù)水平較低,主要采取毛發(fā)水解(酸水解和堿水解)來(lái)提取。L-胱氨酸,再通過(guò)電解還原生產(chǎn) 一半胱氨酸。
。L-胱氨酸的年產(chǎn)量300t以上,大部分用于出口。L-胱氨酸的水解生產(chǎn)方法盡管被廣泛采用,但該方法產(chǎn)量低、能耗高,水解過(guò)程產(chǎn)生難聞氣體及大量的廢酸。
(1)利用多聚酶鏈反應(yīng)(PCR)技術(shù),改造目的基因,使基因產(chǎn)物的活力增加;(2)使用強(qiáng)啟動(dòng)子或獨(dú)立啟動(dòng)子增強(qiáng)目的基因的轉(zhuǎn)錄數(shù);(3)把目的基因到更容易獲得產(chǎn)物的標(biāo)準(zhǔn)菌株或其它菌株中,例如,把目的基因轉(zhuǎn)入對(duì)底物的耐受性增強(qiáng)或者對(duì)產(chǎn)物的反饋抑制具有抗性的菌株;在該工藝中,通過(guò)發(fā)酵法合成OAH是制約L-甲硫氨酸生產(chǎn)和降低成本的關(guān)鍵因素之一。(4)有利于目的基因轉(zhuǎn)錄的基因或缺失抑制基因。
胱硫醚循環(huán)酶法不能夠消除內(nèi)生β-胱硫醚,而恰恰有很多人,尤其是疾病患者的內(nèi)生β-胱硫醚水平非常高(可高達(dá)>300μmol/L,大部份< 20μmol/L)。因此間接法的Hcy試劑受到了內(nèi)生胱硫醚的明顯干擾。另外,間接法試劑易受脂肪酶、鐵試劑干擾。間接法優(yōu)點(diǎn)就是價(jià)格便宜。比較多個(gè)異源的轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白,增強(qiáng)L-半胱氨酸的轉(zhuǎn)運(yùn)能力以及提高前體絲氨酸的供給等策略。