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哪些因素影響瓜蔞苗組培苗實(shí)驗(yàn)室組培結(jié)果
植物組培是二十世紀(jì)發(fā)展起來的一項(xiàng)生物技術(shù),經(jīng)過幾十年的發(fā)展,這項(xiàng)技術(shù)在基礎(chǔ)理論和實(shí)際應(yīng)用方面都獲得了飛快的發(fā)展。隨著時(shí)間的推移,由于遺傳物質(zhì)的同一性,決定兩者的差別會(huì)越來越小。早期的組培報(bào)道,多集中于研究各類植物的培養(yǎng)基組成,包括無機(jī)鹽、有機(jī)物、等培養(yǎng)基成分的種類和配比濃度。近幾年來隨著越來越多培養(yǎng)基研究成果的積累,人們的研究逐漸深入到培養(yǎng)條件方面,如培養(yǎng)溫度、光照強(qiáng)度、容器內(nèi)空氣因素對(duì)組培和培養(yǎng)過程中植物生長(zhǎng)速度、生長(zhǎng)質(zhì)量的影響。組織培養(yǎng)中光照也是重要的條件之一,主要表現(xiàn)在光強(qiáng)、光質(zhì)、以及光照時(shí)間方面:
1、光照強(qiáng)度
光照強(qiáng)度對(duì)培養(yǎng)細(xì)胞的增殖和的分化有重要影響,從目前的研究情況看,光照強(qiáng)度對(duì)外植物體、細(xì)胞的分裂有明顯的影響。一般來說,光照強(qiáng)度較強(qiáng),幼苗生長(zhǎng)的粗壯,而光照強(qiáng)度較弱,幼苗容易徒長(zhǎng)。
2、光質(zhì)
光質(zhì)對(duì)愈傷組織誘導(dǎo),培養(yǎng)組織的增殖以及的分化都有明顯的影響。我國(guó)瓜蔞苗組培苗實(shí)驗(yàn)室組培技術(shù)研究歷史較為悠久,許多學(xué)者將離瓜蔞苗組培苗實(shí)驗(yàn)室離體快繁技術(shù),利用莖尖培養(yǎng)技術(shù)可以進(jìn)行瓜蔞苗組培苗實(shí)驗(yàn)室脫毒種芋、種苗的生產(chǎn),不過,目前我國(guó)瓜蔞苗組培苗實(shí)驗(yàn)室主要病害是軟腐病和白絹病等,脫毒技術(shù)在生產(chǎn)上應(yīng)用不多。其次是紅、黃、綠、藍(lán)光對(duì)生長(zhǎng)有抑制作用,單色光對(duì)葉綠素合成有抑制作用,葉綠素的合成需要在復(fù)合光條件下完成。隨著技術(shù)的不斷進(jìn)步,近年來白光 LED 的發(fā)展相當(dāng)迅速,LED 作為新型的節(jié)能光源,光、能耗小、安全、可靠耐用,而且波長(zhǎng)正好與植物光合成和光形態(tài)形成的光譜范圍相吻合,因此,LED 植物生長(zhǎng)燈在組織培養(yǎng)中的應(yīng)用越來越普遍。
3、光周期
試管苗培養(yǎng)時(shí)要選用一定的光暗周期來進(jìn)行組織培養(yǎng),的周期是16h 的光照,8h 的黑暗。馴化的方法是將長(zhǎng)有完整組培苗的試管或三角瓶由培養(yǎng)室轉(zhuǎn)移到半遮蔭的自然光下,并打開瓶蓋注入少量自來水,使組培苗周圍的環(huán)境逐步與自然環(huán)境相似,恢復(fù)植物體內(nèi)葉綠體的光合作用能力,提高適應(yīng)能力。研究表明,對(duì)短日照敏感的品種的組織,在短日照下易分化,而在長(zhǎng)日照下產(chǎn)生愈傷組織,有時(shí)需要暗培養(yǎng),尤其是一些植物的愈傷組織在暗培養(yǎng)條件下比在光照條件下更好。如紅花、烏飯樹的愈傷組織。除某些材料誘導(dǎo)愈傷組織需要黑暗條件外,一般培養(yǎng)都需一定的光照。
瓜蔞苗組培苗實(shí)驗(yàn)室組培設(shè)備的選定
在瓜蔞苗組培苗實(shí)驗(yàn)室組織培養(yǎng)過程中,根據(jù)所培養(yǎng)的植物種類、生產(chǎn)規(guī)模,選擇合適的器材、設(shè)施是十分必要的,只有這樣才能確保整個(gè)操作過程的順利進(jìn)行。在器材、設(shè)施的選擇上,不要貪大求洋,應(yīng)該在其是否實(shí)用上多下功夫。
在研究型的瓜蔞苗組培苗實(shí)驗(yàn)室組織培養(yǎng)操作中,往往對(duì)器材、設(shè)施的要求較高;而在生產(chǎn)型的組織培養(yǎng)中,則對(duì)器材、設(shè)施的要求卻較為粗放,因此管理者必須根據(jù)實(shí)際情況來進(jìn)行培養(yǎng)器材、設(shè)施的遴選。
瓜蔞苗組培苗實(shí)驗(yàn)室組培試管的選定
在植物組織培養(yǎng)的過程中,從外植體的采收到試管苗的定植都必須要在特定的環(huán)境中進(jìn)行,例如,培養(yǎng)基的配制要在專用的器材、設(shè)施中進(jìn)行;外植體的接種要在專用的器材、設(shè)施中進(jìn)行。(四)對(duì)于蟲害,則可采取勤觀察、早發(fā)現(xiàn)、早防治的措施,對(duì)癥用藥,如蝸??梢杂妹匪活惖恼T殺劑進(jìn)行誘殺,對(duì)介殼蟲則可以用25%的1000倍液直接噴殺,也可以用其他殺介殼蟲的專用防治。應(yīng)該根據(jù)植物組織培養(yǎng)不同階段的需要,選擇不同的器材、設(shè)施。只有從降低投入、提高工效、節(jié)約勞力等諸方面加以考慮,才能降低培養(yǎng)成本、提高培養(yǎng)效率。
在植物組織培養(yǎng)過程中,所使用的器材種類較多,但它們通常可以分為通用器具、盛具、計(jì)量器械、滅菌器械、接種器械、培養(yǎng)器械等幾種類型。4、壓力值:組培車間核心工作間的氣壓(負(fù)壓)與室內(nèi)大氣氣壓的壓差值小于10pa。在使用這些容器、設(shè)備時(shí),必須要了解它們的基本用途,并學(xué)會(huì)它們的基本用法。例如,不能給容量瓶加熱;必須用磨砂玻璃燈罩來熄滅正在燃燒的酒精燈;應(yīng)該定期更換超凈工作如的無菌濾膜等等。詳細(xì)操作可參考具體設(shè)備、容器的使用說明。
瓜蔞苗組培苗實(shí)驗(yàn)室培育流程
瓜蔞苗組培苗實(shí)驗(yàn)室培育流程
對(duì)于一種組培苗的培養(yǎng)流程是什么,可以分為以下幾個(gè)步驟:
1.取材 ,將瓜蔞苗組培苗實(shí)驗(yàn)室在規(guī)?;慕M培快繁生產(chǎn)中,以莖芽作為外植體效果較好 ,瓜蔞苗組培苗實(shí)驗(yàn)室發(fā)生變異的記錄比較低,另外還可以選擇健壯和將萌芽的球莖進(jìn)行接種。這樣的情況是根據(jù)瓜蔞苗組培苗實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行不同的培育方面
2.滅菌,將種球進(jìn)行剝掉外皮,經(jīng)過洗衣粉常規(guī)清洗后,用百分之75酒精消毒,再用容易浸泡10分鐘左右,然后在百分之一率酸鈉容易浸泡10分鐘無菌水需要洗上2次,切取內(nèi)部0.5-0.8的大小的莖尖,接入到芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基,不要以為這樣就完了。
3.還有生長(zhǎng)以及分化,外植體材料是在誘導(dǎo)培養(yǎng)基礎(chǔ)上,經(jīng)過30d的培養(yǎng)后,每塊莖尖均萌發(fā)出不定芽,講不定芽,將不定芽進(jìn)行分切,轉(zhuǎn)移到增值培養(yǎng)基礎(chǔ)上繼代。
4.生根培養(yǎng),將長(zhǎng)到2~3厘米的小苗切下,轉(zhuǎn)接到生根培養(yǎng)的基上,經(jīng)過10天左右的培養(yǎng),便可形成根系的再生植株,這樣就可以移除瓶了,這就是關(guān)于組培苗方面的知識(shí)。