蛋白質(zhì)晶體板技術(shù)研究

隨著人類基因組計劃的完成,近年來生物大分子的結(jié)構(gòu)與功能研究成為生命科學(xué)關(guān)注的熱點(diǎn).晶體學(xué)作為結(jié)構(gòu)生物學(xué)的基礎(chǔ),培養(yǎng)出高質(zhì)量的單晶,對于蛋白質(zhì),核酸等生物大分子三維空間結(jié)構(gòu)的測定是至關(guān)重要的.文章分析和總結(jié)了蛋白質(zhì)結(jié)晶的原理,常用的結(jié)晶化方法以及促進(jìn)蛋白質(zhì)結(jié)晶化技術(shù)研究的新進(jìn)展，蛋白質(zhì)的分離純化的各種原理和方法作了簡要的概述,同時簡單的介紹了蛋白質(zhì)結(jié)晶的方法及影響因素。

蛋白結(jié)晶板研究

再用原子力顯微鏡,磷光成像儀,光密度儀或激光共聚焦掃描儀進(jìn)行檢測,獲得靶蛋白表達(dá)的種類,數(shù)量及關(guān)聯(lián)等信息.蛋白質(zhì)芯片已經(jīng)用于研究蛋白質(zhì)表達(dá)譜構(gòu)成及變化,蛋白質(zhì)與生物分子(蛋白質(zhì),核酸,配體等)的相互作用,抗原體篩選,酶與底物相互作用.蛋白質(zhì)芯片在醫(yī)學(xué)臨床診斷,分析和篩選方面具有潛在的重要應(yīng)用價值。

蛋白質(zhì)晶體板

重組蛋白技術(shù)在蛋白質(zhì)結(jié)晶、蛋白質(zhì)、蛋白質(zhì)相互作用及結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)組學(xué)研究中具有非常重要的作用。當(dāng)前對重組蛋白的純化,目前常采用固定化金屬離子親和色譜(IMAC)技術(shù),即通過IMAC材料上的金屬離子與組氨酸標(biāo)簽之間的螯合作用實(shí)現(xiàn)帶組氨酸標(biāo)簽的重組蛋白的純化,但是由于IMAC材料上金屬離子暴露在材料表面,任何能與金屬離子產(chǎn)生螯合作用的蛋白質(zhì)均獲在IMAC上,如表面富含組氨酸。

因而形核劑的使用對于難結(jié)晶蛋白或者起始濃度過低的蛋白質(zhì)結(jié)晶具有重要意義.隨著結(jié)構(gòu)生物學(xué)的發(fā)展,形核劑在蛋白質(zhì)結(jié)晶中的研究仍是結(jié)晶方法學(xué)領(lǐng)域的熱點(diǎn)問題.多孔微球?qū)Φ鞍踪|(zhì)分子的吸附作用有利于無序蛋白質(zhì)分子團(tuán)簇的形成,進(jìn)而促進(jìn)蛋白質(zhì)形核.添加多孔微球不但可以增加結(jié)晶條件篩選數(shù)。

綜述了雜質(zhì)對蛋白質(zhì)晶體生長影響研究領(lǐng)域的進(jìn)展情況, 對可能的雜質(zhì)來源以及雜質(zhì)對結(jié)晶過程的影響進(jìn)行了介紹,重點(diǎn)介紹了和結(jié)晶蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)相似的雜質(zhì)分子的影響, 包括晶體成核、生長形態(tài)、表面形貌、生長動力學(xué)、質(zhì)量等,以及雜質(zhì)在晶體中的重新分配。