等溫核酸試劑盒

重組酶聚合酶擴(kuò)增技術(shù)（RPA)是2006年由英國(guó)科學(xué)家研發(fā)的一種核酸恒溫?cái)U(kuò)增技術(shù)。它是利用多種酶參與，在體外模擬生物體內(nèi)DNA復(fù)印，恒溫條件下短時(shí)間內(nèi)實(shí)現(xiàn)靶基因大量擴(kuò)增，既可以擴(kuò)增DNA，也可以擴(kuò)增RNA。RPA技術(shù)具有恒溫、快速、便攜、靈敏度高、特異性強(qiáng)和操作簡(jiǎn)單等優(yōu)點(diǎn)，是目前很有望替代PCR技術(shù)的核酸等溫?cái)U(kuò)增方法，在基層現(xiàn)場(chǎng)診斷中，具有廣闊的應(yīng)用前景。

相對(duì)來說RPA是很好的恒溫?cái)U(kuò)增法，可在較低溫下恒溫?cái)U(kuò)增，不需要復(fù)雜儀器設(shè)備，操作簡(jiǎn)單、反應(yīng)時(shí)間短，特異性好、靈敏度高，可采用電泳、熒光、側(cè)向流試紙等多種方式檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物

核酸試劑盒

英國(guó)TwistDx 公司（前身為ASM科技有限公司）成立于1999年，基于英國(guó)劍橋Babraham研究院建立的生物技術(shù)公司。該公司通過突破等溫DNA擴(kuò)增，開發(fā)的重組酶聚合酶擴(kuò)增技術(shù)(RPA),被譽(yù)為DNA診斷領(lǐng)域的革命性創(chuàng)新。

RPA技術(shù)主要依賴于三種酶:能結(jié)合單鏈核酸（寡核苷酸引物）的重組酶、單鏈 DNA結(jié)合蛋白(SSB）和鏈置換DNA聚合酶。這三種酶的混合物在常溫下也有活性，反應(yīng)溫度在37°C左右。

側(cè)向流檢測(cè)試紙條作為一種能夠快速、方便、簡(jiǎn)單、無需人員和大型儀器設(shè)備操作的 一種檢測(cè)核酸的POCT方法，已經(jīng)在臨床診斷，環(huán)境監(jiān)測(cè)和食品安全等領(lǐng)域得到了廣泛的應(yīng)用研究。

為便于現(xiàn)場(chǎng)可視化檢測(cè)，本產(chǎn)品采用了FAM(FITC) -生物素報(bào)告基因進(jìn)行層析檢測(cè)。陰性樣品中，金粒抗生物素與高濃度FAM(FITC) -生物素報(bào)告基因充分結(jié)合，結(jié)合物在對(duì)照Control條帶被抗FAM (FITC)攔截。對(duì)于陽(yáng)性樣本，F(xiàn)AM(FITC) -生物素報(bào)告基因被裂解，金?？股锼氐呐悸?lián)物生物素在檢測(cè)條帶積累，而在對(duì)照條帶積累減少。

基本檢測(cè)原理是首先將待檢產(chǎn)物和兩種檢測(cè)物混合，特異性結(jié)合后形成帶有兩種標(biāo)記（生物素和FITC）的復(fù)合物；隨后將該復(fù)合物滴加到試紙條的加樣區(qū)，與加樣區(qū)的膠體金顆粒結(jié)合，新形成的復(fù)合物在層析膜擴(kuò)散作用下擴(kuò)散至檢測(cè)線，只有標(biāo)記有生物素的復(fù)合物會(huì)被生物素配體捕獲，從而使檢測(cè)線“顯色”，而未結(jié)合檢測(cè)物的膠體金顆粒會(huì)繼續(xù)擴(kuò)散至質(zhì)控線并捕獲進(jìn)而使質(zhì)控線“顯色”。