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工業(yè)合成:三羥本身由于結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單,以中心碳原子呈四面體結(jié)構(gòu),含三個(gè)羥和一個(gè)氨基,可以進(jìn)行多種取代和氧化還原反應(yīng),是一種化工合成原料。緩沖劑TAPS的一種合成方法就是利用Tris和1,3-丙磺酸內(nèi)酯在醇中合成的。通常要采購(gòu)用于工業(yè)合成的Tris原料對(duì)試劑純度要求不高,重點(diǎn)是量大,找產(chǎn)能較大的原料生產(chǎn)廠家是比較劃算的。
Tris通常被用于核酸DNA或RNA的瓊脂糖凝膠電泳中的緩沖液,通常用的緩沖體系有TAE、TBE、TPE等,即生物緩沖劑Tris配合EDTA以及醋酸、硼酸、磷酸等配制成的緩沖溶液。不同公司使用的緩沖液有所差異,相對(duì)來說使用磷酸的TPE較少,主要是使用TAE和TBE緩沖液。在做核酸瓊脂糖凝膠電泳時(shí),首先的準(zhǔn)備工作就是制備凝膠,瓊脂糖凝膠做的好壞直接影響電泳效果和效率。這個(gè)制作過程耗時(shí)較長(zhǎng),節(jié)約時(shí)間考慮也可以直接購(gòu)買制備好的預(yù)制凝膠。
提到緩沖液就不得不延伸一下,這就是Henderson-Hasselbalch方程。
在前面提到,
將等式同時(shí)取對(duì)數(shù),并簡(jiǎn)化就可以得到:
或者
這就是Henderson-Hasselbalch方程。
注意:式子中酸及其共軛堿的濃度都是平衡時(shí)的濃度,除了酸性過于強(qiáng)的情況下,由于同離子效應(yīng)的存在,一般都可用此式計(jì)算。
三羥(Tris)是一種應(yīng)用非常廣泛的有機(jī)試劑,它的有效緩沖范圍在pH7.0到9.2之間。它及其衍生物被廣泛應(yīng)用于生物化學(xué)和分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中的緩沖液的制備,可用于制作、有機(jī)合成、生物緩沖劑等。其中在生化實(shí)驗(yàn)中,許多蛋白質(zhì)及核酸相關(guān)的實(shí)驗(yàn)都需要用Tris作為生物緩沖劑。它甚至有超過磷酸鹽緩沖液的趨勢(shì),本文將對(duì)其衍生緩沖液進(jìn)行簡(jiǎn)述。