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等溫核酸試劑盒
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重組酶與引物結(jié)合形成的蛋白-DNA復(fù)合物,能在雙鏈DNA中尋找同源序列。一旦引物定位了同源序列,就會(huì)發(fā)生鏈交換反應(yīng)形成并啟動(dòng) DNA合成,對(duì)模板上的目標(biāo)區(qū)域進(jìn)行指數(shù)式擴(kuò)增。被替換的 DNA鏈與SSB結(jié)合,防止進(jìn)一步替換。在這個(gè)體系中,由兩個(gè)相對(duì)的引物起始一個(gè)合成事件。
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目前市場(chǎng)上由于缺乏RNA標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),無(wú)法對(duì)檢測(cè)方法進(jìn)行量值傳遞和對(duì)試劑盒檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確度進(jìn)行評(píng)價(jià),好的國(guó)產(chǎn)試劑盒競(jìng)爭(zhēng)力也無(wú)法得到證明。為此,急需研制RNA標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)來(lái)評(píng)價(jià)這些病毒核酸檢測(cè)試劑盒的質(zhì)量和準(zhǔn)確度,為試劑盒檢測(cè)結(jié)果的判定提供準(zhǔn)繩。
數(shù)字PCR作為新定量技術(shù),主要采用當(dāng)前分析化學(xué)熱門研究領(lǐng)域的微流控或微滴化方法,借助專門設(shè)備將50微升左右核酸溶液樣本大量稀釋后,分割成了近10萬(wàn)個(gè)液滴分散至芯片的微反應(yīng)器或微滴中,單一液滴為獨(dú)立反應(yīng)單元,每個(gè)反應(yīng)器的核酸模板數(shù)少于或者等于1個(gè)。