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亞細(xì)胞定位電話「思特進(jìn)」

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發(fā)布時間:2021-06-04 12:05  






武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實(shí)驗技術(shù)研發(fā)、實(shí)驗產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實(shí)驗項目承接為一體的高新技術(shù)公司;公司實(shí)驗中心有分子生物學(xué)平臺、細(xì)胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達(dá)平臺、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺;本課題以六種紫色蔬菜(紫洋蔥、紫甘藍(lán)、羽衣甘藍(lán)、紫山藥、紫薯、紫紅薯)為試材,系統(tǒng)研究了蔬菜中花色苷的前處理方法、定性定量及活性篩選方法,旨在為開發(fā)利用紫色蔬菜中豐富的花色苷資源提供方法和技術(shù)支撐。可以開展各類動、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實(shí)驗。





采用根癌農(nóng)介導(dǎo)的方法,以受控于CaMV35S啟動子的攜帶有GFP報告基因的雙元植物表達(dá)載體pCAMBIA1300-35S-GFP轉(zhuǎn)化洋蔥表皮細(xì)胞.熒光顯微鏡下觀察結(jié)果顯示,GFP基因在經(jīng)浸染和共培養(yǎng)后的洋蔥表皮細(xì)胞中得到了表達(dá),綠色熒光分布在細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)中,為進(jìn)一步研究新基因的亞細(xì)胞定位和瞬時表達(dá)奠定了基礎(chǔ).


武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實(shí)驗技術(shù)研發(fā)、實(shí)驗產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實(shí)驗項目承接為一體的高新技術(shù)公司;公司實(shí)驗中心有分子生物學(xué)平臺、細(xì)胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達(dá)平臺、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺;對這些特異條帶進(jìn)行并測序,其中5個測序成功,另外2個測序失敗??梢蚤_展各類動、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實(shí)驗。




目的構(gòu)建通用型植物GFP標(biāo)簽蛋白表達(dá)載體,研究蛋白質(zhì)的細(xì)胞內(nèi)定位對蛋白質(zhì)組學(xué)和代謝組學(xué)等研究的意義。方法構(gòu)建2種GFP標(biāo)簽蛋白質(zhì)表達(dá)載體,分別在GFP的N和C端預(yù)留位點(diǎn),以目的基因。利用該基因載體,分別內(nèi)切酶Fok I的切割結(jié)構(gòu)域與MS2噬菌體外殼蛋白MCP的串聯(lián)蛋白(Fok I:MCP:Fok I,FMF)至GFP的N和C端,得到FMF與GFP的融合蛋白GFP:FMF和FMF:GFP,其中FMF的N端帶有細(xì)胞核定位信號。利用農(nóng)介導(dǎo)植物瞬時表達(dá)侵染本氏和洋蔥表皮細(xì)胞,觀察GFP熒光表達(dá)情況。結(jié)果成功構(gòu)建了2種融合了目的基因和GFP的表達(dá)載體p ER35GFP-FMF和p ER35FMF-GFP。激光共聚焦結(jié)果顯示侵染了只含GFP載體的農(nóng)的細(xì)胞,可在細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)中檢測到GFP的綠色熒光,而侵染了含核定位信號FMF:GFP和GFP:FMF 2種融合蛋白載體的農(nóng)的細(xì)胞,只在細(xì)胞核中觀察到綠色熒光。結(jié)論該載體系統(tǒng)可運(yùn)用于研究蛋白質(zhì)在植物細(xì)胞中的亞細(xì)胞定位,具有簡單、和通用性的特點(diǎn)。植物在漫長的進(jìn)化過程中發(fā)展出了一套適應(yīng)缺磷環(huán)境的形態(tài)變化及生理生化方面的機(jī)制,包括根系構(gòu)型的改變、酸性磷酸酶、RNA酶及有機(jī)酸的分泌、與叢枝菌根真菌(AMF,ArbuscularMycorrhizalFungi)形成共生體系等等。


武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實(shí)驗技術(shù)研發(fā)、實(shí)驗產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實(shí)驗項目承接為一體的高新技術(shù)公司;公司實(shí)驗中心有分子生物學(xué)平臺、細(xì)胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達(dá)平臺、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺;脂肪族昔(aliphaticglucosinolates,AGSL)是一種廣泛存在于十字花科植物中的含氮、含硫的植物次生代謝產(chǎn)物,其降解產(chǎn)物(如蘿卜硫素)不僅在植物防御、響應(yīng)生物或非生物脅迫的生理過程中具有重要的作用,而且還具有極強(qiáng)的活性。可以開展各類動、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實(shí)驗。




大豆是重要的油料作物和植物蛋白質(zhì)資源,在食品工業(yè)和農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中占有重要地位。大豆花葉病毒病分布非常廣泛,是一種世界害,它嚴(yán)重影響大豆產(chǎn)量和外觀品質(zhì)。目前主要通過適當(dāng)改變播種時期、選用抗病品種、防蚜等措施來降低大豆花葉病毒(SMV)對大豆產(chǎn)量的影響,國內(nèi)外從遺傳工程角度來探索抗SMV途徑的還很少。類甜味蛋白(Thaumatin-like proteins,TLP)是第5類植物病程相關(guān)蛋白,在離體條件下具有很強(qiáng)的抑菌活性。以往關(guān)于類甜味蛋白的抗病研究都限于抗真菌,本研究探討了其與花葉病毒抗性之間的相關(guān)性。GmTLP是本研究從大豆品種科豐1號中利用SMV誘導(dǎo)的雙向電泳技術(shù)分離的類甜味蛋白編碼基因,在大豆中存在兩個拷貝,分別命名為GmTLP1和GmTLP2。本文對GmTLP1在植物中的表達(dá)及功能進(jìn)行了初步研究。研究結(jié)果如下:1實(shí)時熒光定量PCR結(jié)果顯示,在SMV誘導(dǎo)4h、8h、24h、48h時,GmTLP1基因在轉(zhuǎn)錄水平上的表達(dá)量明顯上升,說明在mRNA水平上該基因是響應(yīng)SMV誘導(dǎo)的,并且響應(yīng)模式為雙峰模式。 2半定量RT-PCR結(jié)果顯示,GmTLP1在大豆根、莖、葉、莢中均有表達(dá),只是莢中表達(dá)量相對低一些。3構(gòu)建綠色熒光蛋白融合表達(dá)載體,利用根癌農(nóng)法轉(zhuǎn)化洋蔥表皮細(xì)胞進(jìn)行瞬時表達(dá)。結(jié)論:紅樹Bet/ProT2基因能通過吸收甜菜堿和/或脯氨酸來降低氧化傷害,顯著提高轉(zhuǎn)基因水稻的耐鹽能力。


武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實(shí)驗技術(shù)研發(fā)、實(shí)驗產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實(shí)驗項目承接為一體的高新技術(shù)公司;公司實(shí)驗中心有分子生物學(xué)平臺、細(xì)胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達(dá)平臺、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺;本研究利用在實(shí)驗室已經(jīng)建成的根癌農(nóng)介導(dǎo)的稻瘟菌T-DNA插入突變體庫,挑選了7個致病力缺陷的突變體,提取基因組DNA,PCR檢測確認(rèn)T-DNA的插入。可以開展各類動、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實(shí)驗。





F-box蛋白通過在UPP(泛素-蛋白酶體途徑)中特異識別底物蛋白而參與細(xì)胞周期調(diào)控、轉(zhuǎn)錄調(diào)控、細(xì)胞凋亡、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)等生命活動。很多研究結(jié)果表明F-box蛋白通過SCF復(fù)合體調(diào)節(jié)多種的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑,如IAA、JA、GA和乙烯的信號傳導(dǎo),并且與植物對非生物脅迫的響應(yīng)有很大的關(guān)系。故其對植物抗逆性研究有重要意義。鷹嘴豆是世界第三大豆類作物,主要生長在干旱和半干旱地區(qū)。它具有生育期短,基因組小的特點(diǎn)。經(jīng)過長時間的進(jìn)化和對不良環(huán)境的適應(yīng),鷹嘴豆具有了豐富的耐旱、耐低溫和耐鹽堿等抗逆基因,因此具有其自身的優(yōu)勢來研究植物的抗逆機(jī)制。目前,鷹嘴豆在分子生物學(xué)方面的研究較為少。 本研究從EST庫中挑選到兩個F-box蛋白基因在干旱脅迫下表達(dá),采用RACE技術(shù)其全長,并對目的基因進(jìn)行了初步的生物信息學(xué)分析和轉(zhuǎn)錄水平的表達(dá)譜分析,旨在為進(jìn)一步揭示鷹嘴豆F-box蛋白在植物的生長發(fā)育及在逆境信號傳導(dǎo)中的作用奠定理論基礎(chǔ)。 CarF-box1基因的開放閱讀框(ORF)長1093bp,編碼一條345個氨基酸殘基的多肽,含有F-box結(jié)構(gòu)域和Kelch結(jié)構(gòu)域。其理論等電點(diǎn)為5.38,分子量為38.37kDa。CarF-box1基因不含有內(nèi)含子。尋找參與發(fā)生和轉(zhuǎn)移的相關(guān)基因并深入研究這些基因在發(fā)展過程中的作用,對于闡明的發(fā)病機(jī)制以及診斷、預(yù)防和均具有重要意義。熒光定量PCR分析表明,CarF-box1在鷹嘴豆的根、莖、葉、花、成熟豆和成熟莢中均有表達(dá),在花中表達(dá)極高。


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