武漢思特進科技發(fā)展有限公司成立于2007年，是一家以實驗技術(shù)研發(fā)、實驗產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實驗項目承接為一體的高新技術(shù)公司；公司實驗中心有分子生物學平臺、細胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達平臺、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺；可以開展各類動、植物、細菌、細胞等生物實驗。近研究結(jié)果表明，寡核苷酸探針（16-30nt）能自由出入細菌和組織細胞壁，雜交效率明顯高于長探針，因此，寡核苷酸探針和不對稱PCR標記的小DNA探針或體外轉(zhuǎn)錄標記的RNA探針是組織原位雜交優(yōu)選探針。

熒光原位雜交(Fluorescence in situ hybridization，F(xiàn)ISH)技術(shù)是在已有的性原位雜交技術(shù)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種非性DNA分子原位雜交技術(shù)?；驒z測定義基因檢測：指通過基因芯片等方法對被測者細胞中的DNA分子進行檢測，并分析被檢測者所含致病基因、疾病易感性基因等情況的一種技術(shù)。它利用熒光標記的核酸片段為探針，與染色體上或DNA顯微切片上的特異fl-N：~行雜交，通過熒光檢測系統(tǒng)(熒光顯微鏡)檢測信號DNA序列在染色體或DNA顯微切片上的目的DNA序列，進而確定其雜交位點。FISH技術(shù)檢測時間短，檢測靈敏度高，無污染，已廣泛應(yīng)用于染色體的鑒定、基因定位和異常染色體檢測等領(lǐng)域。FISH是原位雜交技術(shù)大家族中的一員，因其所用探針被熒光物質(zhì)標記（間接或直接）而得名，該方法在80年代末 被發(fā)明，現(xiàn)已從實驗室逐步進入臨床診斷領(lǐng)域。 基本原理是熒光標記的核酸探針在變性后與已變性的靶核酸在退火 溫度下復(fù)性；通過熒光顯微鏡觀察熒光信號可在不改變被分析對象（即維持其原位）的前提下對靶核酸進行分析。

武漢思特進科技發(fā)展有限公司成立于2007年，是一家以實驗技術(shù)研發(fā)、實驗產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實驗項目承接為一體的高新技術(shù)公司；公司實驗中心有分子生物學平臺、細胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達平臺、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺；可以開展各類動、植物、細菌、細胞等生物實驗。結(jié)果被檢1128例羊水間期細胞FISH檢測均成功,其中檢出正常核型1081例,數(shù)目異常核型20例,與常規(guī)細胞染色體核型分析結(jié)果一致,另外27例結(jié)構(gòu)異常FISH技術(shù)未能檢出。

mFISH是在熒光原位雜交基礎(chǔ)上發(fā)展起來的新技術(shù)，它不僅具有FISH的優(yōu)點，而且克服了FISH的許多局限，其特點是可將多次繁頊的FISH實驗和多種不同的基因定位在一次FISH實驗中完成。預(yù)雜交1）每個管中置換成大約300ulHYB－溶液，60℃水浴5分鐘，避免振蕩。mFISH能同時檢測多個基因，分辨復(fù)雜的染色體易位和微小缺失，區(qū)分間期細胞多倍體和超二倍體等。mFISH用激發(fā)光譜和吸收光譜不同的熒光索按一定調(diào)色方法標記不同的探針，從而對不同靶DNA同時進行定位和分析，并能對不同探針在染色體上的位置進行排序。

武漢思特進科技發(fā)展有限公司成立于2007年，是一家以實驗技術(shù)研發(fā)、實驗產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實驗項目承接為一體的高新技術(shù)公司；公司實驗中心有分子生物學平臺、細胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達平臺、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺；可以開展各類動、植物、細菌、細胞等生物實驗。



目的探討熒光原位雜交（FISH）技術(shù)在檢測胎兒染色體異常的臨床應(yīng)用?；驹硎菬晒鈽擞浀暮怂崽结樤谧冃院笈c已變性的靶核酸在退火溫度下復(fù)性。方法選用13、21、18、X、Y特異性探針對1128例孕16～22周有產(chǎn)前診斷指征的婦女羊水間期細胞進行分析,并與同時進行的羊水細胞培養(yǎng)核型分析結(jié)果進行對照。結(jié)果被檢1128例羊水間期細胞FISH檢測均成功,其中檢出正常核型1081例,數(shù)目異常核型20例,與常規(guī)細胞染色體核型分析結(jié)果一致,另外27例結(jié)構(gòu)異常FISH技術(shù)未能檢出。結(jié)論 FISH技術(shù)檢測胎兒染色體數(shù)目異常具有快速、簡便、準確性高、特異性強等優(yōu)點,有較大的臨床應(yīng)用價值,并對產(chǎn)前細胞遺傳學診斷有重要意義。

武漢思特進科技發(fā)展有限公司成立于2007年，是一家以實驗技術(shù)研發(fā)、實驗產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實驗項目承接為一體的高新技術(shù)公司；公司實驗中心有分子生物學平臺、細胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達平臺、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺；可以開展各類動、植物、細菌、細胞等生物實驗。目前基因檢測的方法主要有：熒光定量PCR、基因芯片、液態(tài)生物芯片與微流控技術(shù)等。

顯色以下各步均在室溫下進行。

（1）緩沖液I洗1min。

（2）用含2%正常羊和0.3％TritonX-100的緩沖液I孵育切片30min。

（3）用含1％正常羊和0.3％TronX-100的緩沖液I稀釋羊抗Dig。

（4）將稀釋液滴加在切片上，封口膜覆蓋，濕盒內(nèi)4℃孵育過夜。

（5）緩沖液I洗10min。

（6）緩沖液Ⅱ洗10min。

（7）加顯色液，封口膜覆蓋，避光室溫孵育2～20h，隨時鏡檢，當顯色滿意時入緩沖液Ⅲ終止顯色。

顯色液臨用前配，其配方為：①NBT 45μl；②X-Phospllate液 35μl；③左旋咪唑      2.4mg；④緩沖液Ⅱ 加至10ml。

（8）常規(guī)脫水、透明、封固。

結(jié)果：雜交陽性信號為紫藍色顆粒。