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LC是一種在實(shí)驗(yàn)室中使用頻率很高的儀器設(shè)備，在使用過程中會有很多小技巧，一些小的注意事項(xiàng)，今天就按照 LC構(gòu)成部分：流動相溶劑瓶→高壓泵→進(jìn)樣器→色譜柱→檢測器→廢液，這個(gè)順序一一說明了如何做保養(yǎng)？流動相溶劑瓶的維護(hù)作為流動相起始點(diǎn)的溶劑瓶，通常被盛放水或有機(jī)相溶液。1、水相溶液，對于水相溶液，首要問題是防止污染。對溶劑瓶我們要做的很重要的工作就是勤換流動相，常換常新。2、有機(jī)相溶液，對于有機(jī)相溶液，不必?fù)?dān)心細(xì)菌繁殖的問題。但有機(jī)相易聚合，尤其是在合適的光照條件下極易聚合，在瓶中會出現(xiàn)絮狀聚合沉淀。為防止聚合過程的發(fā)生，裝時(shí)使用棕色溶劑瓶，避免陽光直接照射，更換時(shí)應(yīng)去除瓶底剩余溶液。3、清洗過濾，溶劑瓶內(nèi)的過濾頭，其作用是防止溶液瓶內(nèi)的顆粒雜質(zhì)進(jìn)入儀器的流路系統(tǒng)，其材料一般分為燒結(jié)玻璃石英和不銹鋼兩種，若不慎堵塞將導(dǎo)致流動相吸液不暢，因此必須進(jìn)行清洗，玻璃材料通常用稀泡，不銹鋼材料的可以直接進(jìn)行超聲清洗。

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高壓泵維修泵浦是液相色譜的核心，該泵將流動相從溶劑瓶輸送到液相流路系統(tǒng)，以保證其流量和壓力的穩(wěn)定。高電壓泵的正常狀態(tài)是液相色譜準(zhǔn)確分析的基礎(chǔ)，因此平時(shí)一定要重視泵的保養(yǎng)。1、泵壓波動，很多情況下，泵的問題都反映在壓力上，壓力波動也是一類常見問題。一般情況下，我們可以通過重新清洗流道和再次脫氣來解決。2、濾清器白頭保養(yǎng)，在泵維修中還有一項(xiàng)常做的工作是更換清洗閥上的過濾白頭，通常判斷純水清洗時(shí)的流量為5 mL/min，如果壓力超過1 MPa，可考慮更換。

色譜柱一般用硅膠作基質(zhì)，只能在pH2-9的范圍使用。柱使用一段時(shí)間后，可能會有一些吸附作用強(qiáng)的物質(zhì)留在柱頂，尤其是一些有色物質(zhì)更容易在柱頂?shù)奶盍仙峡吹?。在使用一段時(shí)間后，新的柱頂填料會塌陷，使柱效降低，此時(shí)還可補(bǔ)加填料，使柱效恢復(fù)。如 ODS柱，在每次工作結(jié)束后用強(qiáng)力洗脫劑，如 ODS柱，以沖洗到基線平衡。用鹽緩沖液作流動相時(shí)，用完后用無鹽流動相沖洗。含有鹵族元素的化合物(氟、氯、)可能對不銹鋼管道造成腐蝕，不適合長時(shí)間接觸。HPLC儀柱式安裝如果不經(jīng)常使用，應(yīng)每4-5天開一次電源，沖洗15分鐘。

探測器的維護(hù)1.光源部分探測器的重要組成部分是光源，光源對發(fā)射能量有要求，一旦能量衰減到一定程度，就會出現(xiàn)一系列影響光源使用的問題，如基線噪聲變大、靈敏度下降等。一般 UV燈的使用壽命為2000 h，當(dāng)達(dá)到這一時(shí)，我們就特別注意燈的能量狀況，可通過儀器維護(hù)軟件中自帶的“燈能測試”功能判斷，測試結(jié)果將分別評估低、中、高三個(gè)波長段的能量，一旦某一波長段測試結(jié)果顯示失敗，就表示需要更換燈。2.檢測池探測器的另一個(gè)重要組成部分就是檢測池，也稱為循環(huán)池。一般來說，檢測池是大家比較關(guān)心的問題之一，因?yàn)闄z測池的耐壓能力一般都不高，所以一旦被堵住，很容易造成損壞。實(shí)際上，檢測池一般不太容易堵塞，因?yàn)閹缀跛械念w粒雜質(zhì)都會被色譜柱截獲，因此堵塞檢測器的東西基本不是來自樣品，很可能是后來“產(chǎn)生”，例如，含鹽流動相殘留在檢測池中導(dǎo)致鹽析出。六、廢液處理LC廢液中大部分含有，對人體有一定的危害，對環(huán)境也會造成污染，嚴(yán)禁隨意傾倒，應(yīng)及時(shí)處理。當(dāng)前，國內(nèi)大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室都是把廢液運(yùn)往廢液處理站進(jìn)行無害化處理。

自動化進(jìn)樣器常見的問題是臟，術(shù)語叫做交叉污染，交叉污染產(chǎn)生的原因很直接，樣品殘留在進(jìn)樣針/外表面，并且隨著下一個(gè)進(jìn)樣器的進(jìn)樣器進(jìn)入色譜系統(tǒng)，要解決交叉污染，也很簡單，自動進(jìn)樣器都會有洗針的功能，如果樣品濃度較高，就會有洗針的功能。如忘了開洗針功能，可能污染已殘留在針座或六通閥閥上，此時(shí)要對這兩個(gè)部件進(jìn)行清洗，需要按照說明書上的維修步驟將這兩個(gè)部件拆開超聲清洗。

流量過五關(guān)斬六將，下一站是探測器探測器的一個(gè)非常重要的部分就是光源，通常稱為燈，燈是一種消耗品，像家用燈泡一樣，使用到一定程度就會失效。但家中的燈泡不能像家里的燈泡那樣點(diǎn)不亮?xí)r要更換，因?yàn)榉旁跈z測器中的燈是需要發(fā)射能量的，一旦能量衰減到一定程度，就會出現(xiàn)基線噪聲變大、靈敏度降低等一系列問題。一般情況下，燈泡的壽命是2000 h，當(dāng)達(dá)到這一時(shí)，我們就特別注意燈泡的能量狀況，可以通過在儀器維護(hù)軟件中自帶的“燈能測試”來判斷，測試的結(jié)果將分別對低、高三個(gè)波長段的能量進(jìn)行評估，一旦某一波長段的結(jié)果顯示失敗，就表示要換燈，通常個(gè)失敗的都是低波長段。

色譜柱的使用與維護(hù)色譜柱的正確使用與維護(hù)非常重要，一不小心就會降低柱效，縮短使用壽命，甚至損壞。為了維護(hù)色譜柱，在進(jìn)行色譜分析時(shí)，必須注意以下問題。調(diào)整流量過快…防止壓力、溫度急劇變化和機(jī)械振動。氣溫驟降或使色譜柱從高處落下，都會影響柱內(nèi)填充狀態(tài)；柱壓突然升高或降低，也會對柱內(nèi)填充物產(chǎn)生沖力，所以在調(diào)節(jié)流速時(shí)要緩慢進(jìn)行，在閥進(jìn)樣時(shí)閥的轉(zhuǎn)動不能過緩(如前面所述)。反向色譜柱…一般情況下，色譜柱不能反沖，只有生產(chǎn)者指示柱可以反沖時(shí)，才能反沖去除留在柱頭的雜質(zhì)。反之，反向?qū)⒀杆俳档椭АＧ爸c保護(hù)柱…為了避免破壞固定相，應(yīng)選擇適當(dāng)?shù)牧鲃酉?特別是 pH)。有時(shí)候，一預(yù)柱可以在進(jìn)樣器前連接，分析柱是硅膠粘合時(shí)，預(yù)柱為硅膠，可使流動相在進(jìn)入分析柱前先被硅膠“飽和”，避免分析柱中的硅膠基質(zhì)溶解。不要把復(fù)雜的樣品，特別是生物樣品直接注入到柱中，需要對樣品進(jìn)行預(yù)處理，或者在進(jìn)樣器與色譜柱之間連接一個(gè)保護(hù)柱。保護(hù)柱一般為填充具有相似固定相的短柱。可以也應(yīng)該經(jīng)常更換保護(hù)柱。

如何排除小概率故障？【1】泵壓跳動，跳動范圍約10 bar。對策：原來的小白頭有點(diǎn)臟，換了之后還沒有解決；2、將主動閥上的閥芯取出后，發(fā)現(xiàn)類似氣泡存在，在超聲5分鐘內(nèi)浸入-水溶液中試著除去氣泡，重新安裝后觀察，仍未解決；更換新閥芯，安裝完畢后，再也沒有跳動，觀察一段時(shí)間后比較平穩(wěn)，順利解決。