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等溫核酸試劑盒
TwisAmp nfo說明
TwistAmp? nfo 試劑盒可實現(xiàn)橫向流動檢測用 DNA 擴(kuò)增。若想要通過終點夾心法(例如橫向流動 [LF] 試紙條)檢測有效 DNA 擴(kuò)增反應(yīng)的產(chǎn)物,則適合使用本產(chǎn)品。用戶只需提供引物、探針和模板。非常適用于:開發(fā)低成本的實地橫向流動檢測。
Product code: TANFO02KIT
RNA試劑盒使用方法
使用時一定要根據(jù)自己的實驗需要購買提取試劑盒, 如果不是試劑盒,或許能提出RNA,但不能確保其質(zhì)量以及完整性,會影響RT-PCR、Northern blot、Dot blot、Real time RT PCR、芯片分析、polyA 篩選、體外翻譯、RNase 保護(hù)分析等后續(xù)實驗的結(jié)果。
當(dāng)前提取效果好的是QIANGEN公司生產(chǎn)的RNA提取試劑盒,但其售價較高,單次實驗費用花費太大,對精度要求不高的實驗沒有必要購買,當(dāng)然還有其它的進(jìn)口試劑盒,但是均存在價格高、訂貨周期長的問題(如果碰上國內(nèi)無貨的時候,要從國外發(fā)貨,會等很長一段時間)。普通的提取實驗用國產(chǎn)的試劑盒就足以,價格不高,基本上各地均有現(xiàn)貨,如天根(目前國內(nèi)生產(chǎn)的試劑盒中銷售面比較廣的一種)等,其價格比進(jìn)口試劑盒要便宜許多,且效果還不錯,性價比還可以。
當(dāng)然,就RNA的提取而言,不一定試劑盒的提取效果就非常好,其實采用一些經(jīng)典的RNA提取方法,效果也很不錯,如:TRIZOL、EDTA等,只是試劑盒使用方便,經(jīng)典的方法操作復(fù)雜一些。
重組酶聚合酶擴(kuò)增技術(shù)是近年來建立起的一種新的核酸恒溫擴(kuò)增技術(shù),具有操作簡單、靈敏度高、特異性強、可在短時間內(nèi)快速擴(kuò)增出目的片段等優(yōu)點,在動物疾病早期診斷、現(xiàn)地檢測、進(jìn)出口快速檢疫等方面具有良好的應(yīng)用前景。通過綜述RPA技術(shù)及其在病毒性豬病快速檢測中的應(yīng)用研究進(jìn)展,以期為更好地防控豬病提供參考。
如何提高擴(kuò)增曲線的可重復(fù)性?
優(yōu)化擴(kuò)增曲線考慮以下因素: 對于低拷貝數(shù)模板,不穩(wěn)定擴(kuò)增可能是因為達(dá)到檢測限或者是反應(yīng)混勻程度不同(未混勻的反應(yīng)擴(kuò)增效率不佳)。另外,在低溫情況下存貯,重組酶和輔助蛋白在50%甘油情況下形成沉淀,也是可能導(dǎo)致不穩(wěn)定擴(kuò)增的原因。所以,20x核心反應(yīng)mix在室溫下解凍并震蕩渦旋將使其成為液體,不影響其功能,并且有效提高擴(kuò)增效率。不穩(wěn)定擴(kuò)增也可能是因為master mix量不足,在加入體系前,用戶必須保證震蕩后20x核心反應(yīng)組分均一。