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常用極性固定相包括：硅膠、氧化鋁、弗羅里硅土和含有氰基(CN)、氨基(NH2)、二醇基(2 OH)的粘接硅膠。

正相態(tài)時(shí)，溶液體系的極性應(yīng)按樣品溶劑、淋洗溶劑、洗脫溶劑的順序遞增，洗脫強(qiáng)度也隨之遞增。要確保所選的樣本溶劑不會(huì)洗脫目標(biāo)物，所選的淋洗液應(yīng)在不洗脫目標(biāo)物的前提下，很大限1度地洗脫干擾物，這樣洗脫目標(biāo)物才能碰巧完全洗脫目標(biāo)物。

因此，面對(duì)反相、正相固相萃取，在實(shí)際應(yīng)用中應(yīng)選擇哪一種？鑒于大部分化合物都具有多種功能基團(tuán)，在實(shí)際操作中，主要根據(jù)目標(biāo)物和干擾物的性質(zhì)考慮采用何種萃取機(jī)理。

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負(fù)離子交換填充物(SAX, MAX)

·分析物：陰離子(酸)化合物

·方法：

(a)活化：樣品在非極性有機(jī)溶1劑中作活化處理時(shí)，可用樣品溶劑：在極性溶劑中作樣品處理時(shí)，可用水溶性有機(jī)溶1劑作活化處理，然后用水平衡，然后用合適 pH值的緩沖液平衡。

上樣：樣品溶液的 pH值應(yīng)大于其 pKa的兩個(gè)單位(以保證其電荷)。

洗脫液 pH值：洗脫液 pKa小于兩個(gè)單位(中和分析物的電荷)。

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一般來(lái)說(shuō)，我們需要分離的混合物的性質(zhì)各不相同，很難通過(guò)調(diào)整 PH來(lái)達(dá)到要求。一般而言，在改變流動(dòng)相 PH的基礎(chǔ)上，又加入緩沖鹽以改變組分的選擇性和分離程度。大多數(shù)C18反相分離柱在使用

一、強(qiáng)酸淋洗、強(qiáng)堿

用硅膠作載體的粘結(jié)相填料，其使用要求是：流動(dòng)相 PH值在2.5-7.5之間。在 PH<2時(shí)，流動(dòng)相可能與載體硅膠和合相發(fā)生水解反應(yīng)，從而導(dǎo)致碳鏈損失；在 PH<7時(shí)，流動(dòng)相可能使載體硅膠溶解。因此，硅膠基體C18 (即 ODS)在強(qiáng)堿條件下基本壽命較短，聚合體C18雖然能在高堿性條件下穩(wěn)定工作，但其價(jià)格昂貴，分離性能及模組強(qiáng)度均不如 ODS。

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改進(jìn)凈化方式

在一般情況下，目標(biāo)化合物模式比雜質(zhì)模式的凈化效果要好，如果要分析的是某種特定種類(lèi)的化合物，則較好是用保留目標(biāo)化合物的模式來(lái)分析；舉一個(gè)簡(jiǎn)單的例子，也就是對(duì)蔬菜中的多菌靈和塞菌靈(一類(lèi)堿性農(nóng)1藥)進(jìn)行分析，用陽(yáng)離子交換柱可專(zhuān)一性地保留這些農(nóng)1藥，使其與干擾物基本完全分離，而用正相吸附劑或石墨化炭黑進(jìn)行保留干擾物的操作只能去除主要的干擾物，保留干擾物的數(shù)量較多。

此外，如果可以用多個(gè) SPE柱對(duì)目標(biāo)化合物進(jìn)行凈化，應(yīng)選擇選擇性好的吸附劑；選擇性越高，離子交換>正相>反相。

GP-C18通用反相色譜柱特點(diǎn)：

利用高可控性的單分子層形成技術(shù)和封尾技術(shù)

*柱間重現(xiàn)率高

*選擇性和分離效1率高

適宜于分離酸性1、中1性和堿性化合物，以及多種藥1物和多肽等

建議使用有機(jī)溶1劑或有機(jī)溶1劑/水系統(tǒng)的流動(dòng)相。

無(wú)縫GP-C1用時(shí)比反相色譜柱特

預(yù)埋用容易高可控性的單分子成樣品技術(shù)和封尾

整體*柱間重現(xiàn)

PTFE (聚四氟，特氟龍)

·建議采用單一進(jìn)樣；

·在質(zhì)譜分析中較合適；

優(yōu)良的溶劑耐受能力和化學(xué)相容性；

打孔之后不能重封；

·不建議長(zhǎng)期存放樣品。

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通用規(guī)格：100 mg/1毫升，200 mg/3毫升，500 mg/3毫升，1毫升/6毫升等。例如，在100 mg/mL中，100 mg/mL為填料質(zhì)量，1 mL為空柱管體積，也就是“總填料所占的體積”。

一次使用：為了避免交叉污染，保證檢測(cè)的可靠性， SPE柱一般一次使用。

固相萃取小柱主要作用及目的：用于樣品分離、提純、富集，減少基質(zhì)干擾，提高檢測(cè)靈敏度

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消除基體干擾：固相萃取可有效去除干擾物質(zhì)，從而保證高靈敏度、高選擇性和 HPLC/MS穩(wěn)定可靠地聯(lián)用

減少離子抑制：在 HPLC/MS聯(lián)用分析中，固相萃取可有效去除引起離子抑制的主要物質(zhì)。消除這些干擾物可以提高質(zhì)譜的相關(guān)性，從而降低 zui的低定量極限。

目標(biāo)分析物濃縮：通常情況下，目標(biāo)化合物的濃度往往很低，以致于不能準(zhǔn)確地定量。固相萃取可以在不富集干擾物的情況下富集分析物。

改進(jìn)分析系統(tǒng)性能：固相萃取可以提高分析系統(tǒng)的性能，如：延長(zhǎng)分析色譜柱的使用壽命，減少系統(tǒng)停機(jī)和維護(hù)時(shí)間；降低離子抑制作用至零度，提高信號(hào)對(duì)應(yīng)性。