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色譜柱一般用硅膠作基質(zhì)，只能在pH2-9的范圍使用。柱使用一段時間后，可能會有一些吸附作用強(qiáng)的物質(zhì)留在柱頂，尤其是一些有色物質(zhì)更容易在柱頂?shù)奶盍仙峡吹?。在使用一段時間后，新的柱頂填料會塌陷，使柱效降低，此時還可補(bǔ)加填料，使柱效恢復(fù)。如 ODS柱，在每次工作結(jié)束后用強(qiáng)力洗脫劑，如 ODS柱，以沖洗到基線平衡。用鹽緩沖液作流動相時，用完后用無鹽流動相沖洗。含有鹵族元素的化合物(氟、氯、)可能對不銹鋼管道造成腐蝕，不適合長時間接觸。HPLC儀柱式安裝如果不經(jīng)常使用，應(yīng)每4-5天開一次電源，沖洗15分鐘。

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探測器的維護(hù)1.光源部分探測器的重要組成部分是光源，光源對發(fā)射能量有要求，一旦能量衰減到一定程度，就會出現(xiàn)一系列影響光源使用的問題，如基線噪聲變大、靈敏度下降等。一般 UV燈的使用壽命為2000 h，當(dāng)達(dá)到這一時，我們就特別注意燈的能量狀況，可通過儀器維護(hù)軟件中自帶的“燈能測試”功能判斷，測試結(jié)果將分別評估低、中、高三個波長段的能量，一旦某一波長段測試結(jié)果顯示失敗，就表示需要更換燈。2.檢測池探測器的另一個重要組成部分就是檢測池，也稱為循環(huán)池。一般來說，檢測池是大家比較關(guān)心的問題之一，因為檢測池的耐壓能力一般都不高，所以一旦被堵住，很容易造成損壞。實際上，檢測池一般不太容易堵塞，因為幾乎所有的顆粒雜質(zhì)都會被色譜柱截獲，因此堵塞檢測器的東西基本不是來自樣品，很可能是后來“產(chǎn)生”，例如，含鹽流動相殘留在檢測池中導(dǎo)致鹽析出。六、廢液處理LC廢液中大部分含有，對人體有一定的危害，對環(huán)境也會造成污染，嚴(yán)禁隨意傾倒，應(yīng)及時處理。當(dāng)前，國內(nèi)大多數(shù)實驗室都是把廢液運往廢液處理站進(jìn)行無害化處理。

如果換下來的是灰黑色的，這是常見的情況，這是由于泵頭密封墊磨損造成的，如果出現(xiàn)頻繁更換白頭切替換下來的都是灰黑色的，這是常見的情況，這是因為泵頭密封墊的磨損所致，如果出現(xiàn)頻繁更換白頭切替換下來的情況，就該講衛(wèi)生了。3.3流動相替代有時會在泵的使用中出現(xiàn)，這種替代是指將流動相從反相溶劑替換為正相溶劑，或反過來替換為溶劑，這個過程的是與流動相的兼容性，常用的正反相色譜溶劑是不互溶的，因此在更換中間，必須用異沖洗系統(tǒng)，保證管路中所有的原有溶劑都不能完全溶解。

繼續(xù)往前走，到進(jìn)樣器，進(jìn)樣器分為手動和自動兩大類，雖然它們的工作方式不同，但要點基本相同：4.1自動進(jìn)樣器常見的問題是臟，用術(shù)語稱其為交叉污染，交叉污染產(chǎn)生的原因非常直接，樣品在進(jìn)樣針/外表面殘存，并且在下一個進(jìn)樣進(jìn)入色譜系統(tǒng)時，要解決交叉污染，也很簡單，就是洗，自動進(jìn)樣器都會有洗針的功能，如果樣品濃度較高，就會有洗針的功能。如忘了開啟洗針功能，可能會殘留在針座或流通閥上，此時要將這兩個部件清洗，需要按照說明書上的維修步驟將這兩個部件拆開超聲清洗。4.2在自動進(jìn)樣器中還出現(xiàn)了峰面積重新生成的問題。一般這是因為自動進(jìn)樣器在吸樣品時有問題，首先要觀察樣品的液面是否夠高，以保證進(jìn)樣器能被吸進(jìn)；如果排除了這個問題，要看一下自動進(jìn)樣器的設(shè)置，對于一些粘度大的樣品，要降低自動進(jìn)樣器的吸收速度，這個時候要看一下樣品瓶的吸入量；當(dāng)然，還有一些比較少見的問題：樣品被吸附在樣品瓶上，此時要考慮更換樣品瓶；還有一種情況，是因為樣品瓶的瓶蓋擰緊太緊，所以這個時候要考慮把瓶蓋擰松。

有些孩子做的比較好，為了防止其，禁止灰塵進(jìn)入小房間，創(chuàng)造了種種發(fā)明，他們在屋頂上鉆了幾個小孔，進(jìn)氣孔用濾頭堵住，既能進(jìn)氣又能防塵，效果很棒。有些使用了安全帽，其效果是一樣的。流化床本身的要求也很嚴(yán)格，超聲波除氣當(dāng)然是必選，微膜過濾也要經(jīng)過這一關(guān)，除去有害氣體，濾掉有害顆粒，還要經(jīng)過濾頭的檢驗——濾頭孔徑是0.45 um，材料分為玻璃燒英和不銹鋼的，如果這個東西臟了的話，就會造成吸液不暢，不過可以進(jìn)行清洗，玻璃材質(zhì)的一般是用稀浸過夜的。

除氣裝置流動相經(jīng)過過濾頭檢測的流動相自然要經(jīng)過預(yù)脫氣，這樣可以大大降低脫氣機(jī)的工作負(fù)荷，因為脫氣機(jī)的脫氣效率是一定的，如果溶解的氣體超過了脫氣機(jī)能處理的大值(特別是在高流速的情況下)，氣體就會去除不干凈，這時就有可能在混合時，形成氣泡影響儀器壓力波動和噪音。流動性耐動，如果長時間待在脫氣機(jī)中，由于微生物的存在，細(xì)菌藻類很可能繼續(xù)繁殖，脫氣管道中布滿了藻類而堵塞，亦或也會聚合，因此，長時間不用的脫氣機(jī)一定將水替換成，防止長藻和聚合。堵漏是一對歡喜冤家，液相色譜上可以堵住的地方，也都有可能漏出，脫氣機(jī)也不例外，通常漏液有兩種可能，一種是接頭松動，再擰緊，再擰緊，就比較倒霉了。

HPLC的 HPLC經(jīng)驗：【1】泵壓跳動，跳動范圍約10 bar。對策：原來的小白頭有點臟，換了之后還沒有解決；2、將主動閥上的閥芯取出后，發(fā)現(xiàn)類似氣泡存在，在超聲5分鐘內(nèi)浸入-水溶液中試著除去氣泡，重新安裝后觀察，仍未解決；更換新閥芯，安裝完畢后，再也沒有跳動，觀察一段時間后比較平穩(wěn)，順利解決。【2】失敗原因：①plug homing over pressure②注漿和設(shè)流速時，無壓力，無液體流出③檢光閘不能復(fù)位④進(jìn)完大濃度樣品后，進(jìn)空白相應(yīng)位置也出峰。

起因：①在線過濾堵塞②泵頭下訂單向閥堵住③檢測池很臟，也有可能是光路有些堵，再不行可能是燈壽命到了④抹布臟了，需要更換。對策：①在線濾網(wǎng)卸下，置燒杯，加純化水煮沸5-10分鐘后，超一下一般就可以了，如果還堵的話就拿稀泡，還不行，就換新的，這是個消耗品②將泵頭下端向閥卸下，兩個都可能堵死，剛卸下來時豎在耳邊搖晃就聽不到聲音了。只要簡單地拿起洗耳球?qū)蜗蜷y吹一次(注意方向)，吹了沒反應(yīng)可以拿溶劑超聲檢查，但不可用水煮，一般超至在耳邊搖能聽到聲音就不會影響到。③先用溶劑將檢測池沖洗一下，具體的試樣用什么試樣；若不沖洗，將檢測池卸下，看燈能量，若能量還可以(有個幾千)，可能得清洗光路。首先還是請工程師來清潔，因為要清理的零件在探測器下面有一個黑色的碎片，中間有一條縫，而且那一塊的螺絲都是八角的，卸起來很麻煩。④拿出5個樣品盤，可以看到里面有一個黑色凸起(看不清是用電筒)，平時進(jìn)樣針就是從那個地方吸的。伸手就能卸下來，里面有一個小白圈(用多了自然就黑了)，換一個新的就好了，一般只有10個才能買儀器。