固定劑先應(yīng)用在光學(xué)顯微技術(shù)中，但光學(xué)顯微鏡中使用的沉淀凝集蛋白性的固定劑對電鏡并不特別適用。于是人們引入和中性甲醛進(jìn)行固定。早期的電鏡生物樣品化學(xué)固定法都采用單一固定，但不能很好地保存糖原和其它碳水化合物，而且在組織中的滲透速度比較慢（約2mm/h）。電鏡中使用的固定劑都有毒性，操作時都要很小心，盡可能在通風(fēng)櫥中完成操作。如果實(shí)驗(yàn)室中發(fā)生固定劑泄漏，必須立即用大量奶粉覆蓋泄漏出來的溶液，待反應(yīng)充分后收集處理。


固定的目的:保存細(xì)胞固有的物質(zhì)，能凝固或沉淀細(xì)胞內(nèi)或組織液，糖原等，使細(xì)胞或組織基本上保持與生活時的物質(zhì)一樣。細(xì)胞的固有物質(zhì)，即細(xì)胞核、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、線粒體、高爾基器、溶酶體、過氧體，細(xì)胞骨架，組織液，抗原、糖元等。這些物質(zhì)，如果不將其及時固定，是很容易喪失的，尤其是溶酶體，很容易受到破壞，因此應(yīng)特別小心。

當(dāng)前，應(yīng)用于固定試劑的種類較多，它們對于固定不同的組織成分起著不同的作用，因此我們在使用時應(yīng)該了解不同固定劑的效能，才能合理的固定組織。根據(jù)Bencroft的分類法，將不同的固定劑分為四種類型：Ⅰ類：醛類，甲醛，多聚甲醛，已二醛，丙二醛等。Ⅱ類：氧化劑類，（奧酸）等。Ⅲ類：蛋白變性類，乙醇，醋酸等。Ⅳ類：其他，氯化，等

上述四種類型的固定劑，常使用的是甲醛，其余的也在其它病理技術(shù)方面中用到。

甲醛商品名為福爾0馬林，一般市售的含甲醛37—40%，由甲醛氣體飽和于水而成，比重為1.12。它也可以穩(wěn)定的固體形式存在，它的成分為高分子量的聚合體，稱為多聚甲醛。甲醛溶液較難純化，在每批市售商品中，都含有不少的雜質(zhì)如甲0醇，這種在組織化學(xué)方法當(dāng)中，能使酶鈍化，影響其反應(yīng)。甲酸，它可使固定液變酸，在陳列標(biāo)本或長時間固定的組織，由于酸的作用，往往細(xì)胞核染色欠佳。甲醛有效固定作用的要點(diǎn)是，在蛋白質(zhì)末端基團(tuán)之間形成交聯(lián)鏈。參與甲醛固定蛋白質(zhì)的基團(tuán)，主要為氨基，亞氨基及酰氨基，肽，胍基，羥基，SH和芳香環(huán)。甲醛與組織蛋白類的反應(yīng)是多樣和復(fù)雜的，因?yàn)樗芎投喾N不同的功能基團(tuán)結(jié)合，在多數(shù)情況下在其間形成橋鍵。甲醛有這種交聯(lián)的功能，也是它的缺點(diǎn)，在用甲醛固定過的組織中，需要做免0疫組化的，往往提倡用酶消化或熱抗原修復(fù)法來使蛋白與甲醛交聯(lián)的醛鍵斷裂開，以利于后來的染色。