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發(fā)布時間:2020-07-19 14:04  






  胎牛血清使用方法:在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,經(jīng)常加入5%-20%的胎牛血清,常使用的澳洲胎牛血清濃度是10%。高濃度的血清可能改變細(xì)胞的基因表達譜,影響后續(xù)實驗的結(jié)果,我們在實驗中使用10%的澳洲胎牛血清培養(yǎng)293T細(xì)胞,效果非常好。但是有些細(xì)胞也會使用5%的Gibco FBS或者20%的澳洲胎牛血清,要根據(jù)具體 細(xì)胞選擇合適的澳洲胎牛血清濃度。





抗體保存注意事項:大部分抗體的運輸條件:一般的運輸過程需要1-2 周的時間,所以是在4 度的條件下來完成的。4 度運輸zui主要的目的是為了避免反復(fù)凍融對抗體活性的損害(如果使用干冰運輸,那么收到時抗體是凍起來的,為了分裝就需要解凍。這就多了一次凍融的過程)。所以運輸過程中避免干冰運輸!特殊抗體的保存條件:1. 酶聯(lián)抗體:永遠(yuǎn)保存在4 度,避免凍起來。否則會導(dǎo)致酶活性的下降或者喪失。2. 偶聯(lián)抗體:所有偶聯(lián)抗體都是在棕色管中或使用錫箔紙避光保存。尤其是熒光抗體,對光極為敏感,因此在所有的實驗階段也是要避光操作的!




  血清中的沉淀物對細(xì)胞培養(yǎng)有什么影響?污染。磷酸鈣往往被誤認(rèn)為微生物污染而引起爭duan,研究者可能會在血清中觀察到一些 絮狀的沉淀,因此就會比較警覺的去做無菌試驗,將血清放在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)幾天,結(jié)果可能會觀察到更多的絮狀沉淀,因此就斷定血清被污染了。并且當(dāng)研究者將血清樣品放在倒置顯微鏡下觀察時往往可以看到一些可以運動的小黑點,因此就更加確認(rèn)是血清被污染了。于是,研究者就會花費更多的時間和精力來和生產(chǎn)商確認(rèn),但zui終確定血清沒有被污染而只是沉淀。為了避免這些問題的發(fā)生,我們建議不要直接將血清放在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)觀察是否有菌,而是將血清加到瓊脂板上進行培養(yǎng)以觀察是否有細(xì)菌生長。另外,也可以進行革蘭氏染色,在油鏡下觀察,以確認(rèn)是否有污染。


胎牛血清的使用注意事項:

 1、解凍血清時,請按照所建議的逐步解凍法(-2O。C至4。

C至室溫),若血清解凍時改變的溫度太大(如-20。C至37。C),實驗顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。

 2、解凍血清時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生.

 3、請勿將血清置于37。C太久。若在37。C放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會因此受到損害,而影響血清的質(zhì)量。



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