武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年，是一家以實(shí)驗(yàn)技術(shù)研發(fā)、實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目承接為一體的高新技術(shù)公司；公司實(shí)驗(yàn)中心有分子生物學(xué)平臺(tái)、細(xì)胞平臺(tái)、光鏡平臺(tái)、植物組培平臺(tái)、原核蛋白表達(dá)平臺(tái)、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺(tái)；可以開(kāi)展各類動(dòng)、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實(shí)驗(yàn)。近研究結(jié)果表明，寡核苷酸探針（16-30nt）能自由出入細(xì)菌和組織細(xì)胞壁，雜交效率明顯高于長(zhǎng)探針，因此，寡核苷酸探針和不對(duì)稱PCR標(biāo)記的小DNA探針或體外轉(zhuǎn)錄標(biāo)記的RNA探針是組織原位雜交優(yōu)選探針。

熒光原位雜交(Fluorescence in situ hybridization，F(xiàn)ISH)技術(shù)是在已有的性原位雜交技術(shù)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的一種非性DNA分子原位雜交技術(shù)?；驒z測(cè)定義基因檢測(cè)：指通過(guò)基因芯片等方法對(duì)被測(cè)者細(xì)胞中的DNA分子進(jìn)行檢測(cè)，并分析被檢測(cè)者所含致病基因、疾病易感性基因等情況的一種技術(shù)。它利用熒光標(biāo)記的核酸片段為探針，與染色體上或DNA顯微切片上的特異fl-N：~行雜交，通過(guò)熒光檢測(cè)系統(tǒng)(熒光顯微鏡)檢測(cè)信號(hào)DNA序列在染色體或DNA顯微切片上的目的DNA序列，進(jìn)而確定其雜交位點(diǎn)。FISH技術(shù)檢測(cè)時(shí)間短，檢測(cè)靈敏度高，無(wú)污染，已廣泛應(yīng)用于染色體的鑒定、基因定位和異常染色體檢測(cè)等領(lǐng)域。FISH是原位雜交技術(shù)大家族中的一員，因其所用探針被熒光物質(zhì)標(biāo)記（間接或直接）而得名，該方法在80年代末 被發(fā)明，現(xiàn)已從實(shí)驗(yàn)室逐步進(jìn)入臨床診斷領(lǐng)域。 基本原理是熒光標(biāo)記的核酸探針在變性后與已變性的靶核酸在退火 溫度下復(fù)性；通過(guò)熒光顯微鏡觀察熒光信號(hào)可在不改變被分析對(duì)象（即維持其原位）的前提下對(duì)靶核酸進(jìn)行分析。

武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年，是一家以實(shí)驗(yàn)技術(shù)研發(fā)、實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目承接為一體的高新技術(shù)公司；公司實(shí)驗(yàn)中心有分子生物學(xué)平臺(tái)、細(xì)胞平臺(tái)、光鏡平臺(tái)、植物組培平臺(tái)、原核蛋白表達(dá)平臺(tái)、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺(tái)；可以開(kāi)展各類動(dòng)、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實(shí)驗(yàn)。結(jié)果被檢1128例羊水間期細(xì)胞FISH檢測(cè)均成功,其中檢出正常核型1081例,數(shù)目異常核型20例,與常規(guī)細(xì)胞染色體核型分析結(jié)果一致,另外27例結(jié)構(gòu)異常FISH技術(shù)未能檢出。

mFISH是在熒光原位雜交基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的新技術(shù)，它不僅具有FISH的優(yōu)點(diǎn)，而且克服了FISH的許多局限，其特點(diǎn)是可將多次繁頊的FISH實(shí)驗(yàn)和多種不同的基因定位在一次FISH實(shí)驗(yàn)中完成。預(yù)雜交1）每個(gè)管中置換成大約300ulHYB－溶液，60℃水浴5分鐘，避免振蕩。mFISH能同時(shí)檢測(cè)多個(gè)基因，分辨復(fù)雜的染色體易位和微小缺失，區(qū)分間期細(xì)胞多倍體和超二倍體等。mFISH用激發(fā)光譜和吸收光譜不同的熒光索按一定調(diào)色方法標(biāo)記不同的探針，從而對(duì)不同靶DNA同時(shí)進(jìn)行定位和分析，并能對(duì)不同探針在染色體上的位置進(jìn)行排序。

武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年，是一家以實(shí)驗(yàn)技術(shù)研發(fā)、實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目承接為一體的高新技術(shù)公司；公司實(shí)驗(yàn)中心有分子生物學(xué)平臺(tái)、細(xì)胞平臺(tái)、光鏡平臺(tái)、植物組培平臺(tái)、原核蛋白表達(dá)平臺(tái)、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺(tái)；可以開(kāi)展各類動(dòng)、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實(shí)驗(yàn)。



目的探討熒光原位雜交（FISH）技術(shù)在檢測(cè)胎兒染色體異常的臨床應(yīng)用?；驹硎菬晒鈽?biāo)記的核酸探針在變性后與已變性的靶核酸在退火溫度下復(fù)性。方法選用13、21、18、X、Y特異性探針對(duì)1128例孕16～22周有產(chǎn)前診斷指征的婦女羊水間期細(xì)胞進(jìn)行分析,并與同時(shí)進(jìn)行的羊水細(xì)胞培養(yǎng)核型分析結(jié)果進(jìn)行對(duì)照。結(jié)果被檢1128例羊水間期細(xì)胞FISH檢測(cè)均成功,其中檢出正常核型1081例,數(shù)目異常核型20例,與常規(guī)細(xì)胞染色體核型分析結(jié)果一致,另外27例結(jié)構(gòu)異常FISH技術(shù)未能檢出。結(jié)論 FISH技術(shù)檢測(cè)胎兒染色體數(shù)目異常具有快速、簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確性高、特異性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn),有較大的臨床應(yīng)用價(jià)值,并對(duì)產(chǎn)前細(xì)胞遺傳學(xué)診斷有重要意義。

武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年，是一家以實(shí)驗(yàn)技術(shù)研發(fā)、實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目承接為一體的高新技術(shù)公司；公司實(shí)驗(yàn)中心有分子生物學(xué)平臺(tái)、細(xì)胞平臺(tái)、光鏡平臺(tái)、植物組培平臺(tái)、原核蛋白表達(dá)平臺(tái)、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺(tái)；可以開(kāi)展各類動(dòng)、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實(shí)驗(yàn)。目前基因檢測(cè)的方法主要有：熒光定量PCR、基因芯片、液態(tài)生物芯片與微流控技術(shù)等。

顯色以下各步均在室溫下進(jìn)行。

（1）緩沖液I洗1min。

（2）用含2%正常羊和0.3％TritonX-100的緩沖液I孵育切片30min。

（3）用含1％正常羊和0.3％TronX-100的緩沖液I稀釋羊抗Dig。

（4）將稀釋液滴加在切片上，封口膜覆蓋，濕盒內(nèi)4℃孵育過(guò)夜。

（5）緩沖液I洗10min。

（6）緩沖液Ⅱ洗10min。

（7）加顯色液，封口膜覆蓋，避光室溫孵育2～20h，隨時(shí)鏡檢，當(dāng)顯色滿意時(shí)入緩沖液Ⅲ終止顯色。

顯色液臨用前配，其配方為：①NBT 45μl；②X-Phospllate液 35μl；③左旋咪唑      2.4mg；④緩沖液Ⅱ 加至10ml。

（8）常規(guī)脫水、透明、封固。

結(jié)果：雜交陽(yáng)性信號(hào)為紫藍(lán)色顆粒。