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PCR實驗室嚴格的管理
(1)嚴格控制進出實驗室的人員。與實驗無關的人員不得隨意進出實驗室,有條件的情況下要設置獨立的通道和進出整個實驗區(qū)的門;
(2)盡量減少在實驗區(qū)內不必要的走動以減少交叉污染的可能性。
(3)擴增產物分析區(qū)是主要的擴增產物污染來源,廢液不能在實驗室中傾倒,必須經消毒液浸泡消毒后在遠離實驗室的地方棄掉,用過的吸頭等一次性材料也應經消毒液浸泡消毒后統(tǒng)一處理,如焚燒等;
(4)擴增產物分析區(qū)可能會用到某些可致基因突變和有毒物質,應特別注意實驗人員的安全防護。
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清潔空調機組電氣控制柜中的重要部件,并定期緊固和清潔。在聚合酶鏈反應純化中,電氣控制柜中重要部件的螺絲應每月擰緊,應監(jiān)測滿負荷時的工作電流和溫度,部件表面應清潔,每年應檢查接地。
空氣通過空氣處理機中的1級和中級效率過濾裝置過濾后,然后由過濾器過濾成清潔空氣,并送至實驗室。pcr凈化柜中的初、中效過濾器應根據(jù)使用情況定期清洗或更換,過濾器的表面清潔度和壓差應根據(jù)外部環(huán)境及時檢查,以便定期更換初、中效過濾器。
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PCR實驗室各區(qū)域儀器設備配備通常如下:
1、標準的PCR實驗室擴增區(qū)主要儀器就是核酸擴增熱循環(huán)儀(PCR儀,實時熒光或普通的)。熱循環(huán)儀的電源應專用,并配備一個穩(wěn)壓電源或UPS,以防止由于電壓的波動對擴增測定的影響。此外,根據(jù)工作需要,還可配備加樣器、超凈臺等。
2、標準的PCR實驗室產物分析區(qū):本區(qū)所使用的儀器設備可能有加樣器、電泳儀(槽)、電轉印儀、雜交爐或雜交箱、水浴箱、DNA測序儀等。在理想情況下,PCR實驗室試劑準備、標本制備、擴增三個區(qū)域可設置緩沖間。在緩沖間內,可設置正壓,使室內空氣不流向室外,室外空氣不流向室內。