低溫生物菌種的技術(shù)規(guī)程

1、安瓿管或凍存管的準(zhǔn)備

預(yù)凍時(shí)一般冷凍速度控制在以每分鐘下降1℃為好、使樣品凍結(jié)到-35℃。

                                                         喚醒盛水的低溫生物菌種

目前，保藏中心保存有各類微生物資源5700種、50000余株，用于專利程序的生物材料有1萬余株。那么，數(shù)目龐大的微生物資源，從“清醒”到被“沉睡”經(jīng)歷了什么？

“首先進(jìn)行存活度和純度檢測(cè)，然后用基因測(cè)定來核實(shí)菌種的正確性，繼而用真空冷凍干燥法或液氮超低溫凍結(jié)法保存菌種?！北２鼐N時(shí)一般兩種方法會(huì)互為備份，使用液氮法保存6份，真空法則要備份12個(gè)。

“通過冷凍技術(shù)處理后，細(xì)菌就會(huì)處于休眠狀態(tài)。如果要活化使用，則需通過相應(yīng)的培養(yǎng)液進(jìn)行活化，才能恢復(fù)活性。”以格氏嗜鹽堿為例說，復(fù)活菌種所需的營養(yǎng)為：20%的氯化鈉，酪蛋白、氨基酸、pH值為9等，在適宜的溫度和培養(yǎng)基中，這些沉睡的細(xì)菌便會(huì)被重新喚醒。

低溫生物菌種的復(fù)壯定義

菌種的復(fù)壯(rejuvenation):使衰的菌種恢復(fù)原來優(yōu)良性狀。

狹義的復(fù)壯是指在菌種已發(fā)生衰的情況下，通過純種分離和生產(chǎn)性能測(cè)定等方法，從衰的群體中找出未衰的個(gè)體，以達(dá)到恢復(fù)該菌原有典型性狀的措施;

廣義的復(fù)壯是指在菌種的生產(chǎn)性能未衰前就有意識(shí)的經(jīng)常、進(jìn)行純種的分離和生產(chǎn)性能測(cè)定工作，以期菌種的生產(chǎn)性能逐步提高。實(shí)際上是利用自發(fā)突變(正變)不斷地從生產(chǎn)中選種。