低溫生物菌種——菌種分離方法

組織分離法

先將所需的藥用真菌采集回來，選取新鮮、個(gè)體大、壯實(shí)、中齡及無病蟲害的子實(shí)體（或菌核、菌索），作為分離用的材料。若為子實(shí)體，取其菌蓋或菌柄組織；若為菌核，取其全部或部分（如茯苓）菌核；若為菌索，取其部分根狀菌索（如蜜環(huán)菌）。再用75 %酒精進(jìn)行表面消毒2 分鐘，用無菌水（或冷開水）沖洗數(shù)次，洗凈殘留的藥液后切成小塊。，然后，放入PDA 培養(yǎng)基的試管或培養(yǎng)皿上，置24 ～26℃溫度下，培養(yǎng)5 ～ 7 天。在分離的真菌組織周圍見長(zhǎng)有白色菌絲時(shí)，應(yīng)及時(shí)將菌絲移至斜面試管培養(yǎng)基上，再置溫度24 ～26 ℃下培養(yǎng)7～10 天，即得純菌種。所得的純菌種還可繼續(xù)擴(kuò)大培養(yǎng)或保藏。

低溫生物的設(shè)備

耐低溫的中試設(shè)備，冰下水溫適用于3.5度（保持在5度左右），COD、氮和磷的去除率依然非常高，經(jīng)連續(xù)取樣檢測(cè)，污水中的COD、總磷和氨氮的降解率分別達(dá) 67%、56%和70%.中試非常成功。經(jīng)中試驗(yàn)證：耐低溫，在水溫3.5度時(shí)，微生物活性依舊非常高，各項(xiàng)指標(biāo)去除率都達(dá)到50%以上，是中溫微生物無法比擬的。

生物菌種發(fā)酵成有機(jī)肥如何操作的？

發(fā)酵肥料操作過程：

1、菌種一般用量為0.2%--0.5%。

2、原輔料及要求：主要物料：水果渣、干蔗渣、食用菌渣、酒糟、啤酒糟、糖渣、醋渣、淀粉渣、木薯渣、檸檬酸渣、醬油渣、味精渣、粉渣、豆腐渣、藥渣、油渣、油餅粕、糠麩、棉菜粕、霉變飼料、污泥、糖廠啤酒廠渣泥、屠宰下腳料、潲（泔）水、剩飯菜、人動(dòng)物糞便等大宗物料。

輔料：各種農(nóng)作物秸稈、樹葉雜草、瓜藤、稻草、松殼、花生殼、鋸木屑、谷殼粉、統(tǒng)糠等干燥、粉碎、高碳即可。

3、原輔料配比：主料∶輔料=5:1-3:1。

4、水分控制在60-65%，手抓物料成團(tuán)剛好出水。

5、按要求將菌種、主料和輔料全部混合均勻

6、環(huán)境溫度15℃以上，一次堆料不少于4方，堆成寬1.5～2米、高0.6米左右、長(zhǎng)度不限的堆，并用棍在堆內(nèi)打通氣孔。

7、堆溫升至50℃時(shí)開始翻倒，每天一次，如堆溫超過65℃，再加次翻倒。溫度控制在70℃以下，溫度太高對(duì)養(yǎng)分有影響。

8、腐熟標(biāo)志：堆溫降低，物料疏松，無物料原臭味，稍有氨味，堆內(nèi)產(chǎn)生白色菌絲。

9、腐熟的原肥：直接使用，生產(chǎn)商品有機(jī)肥、生物有機(jī)肥、有機(jī)無機(jī)復(fù)混肥、生物有機(jī)無機(jī)復(fù)混肥等。

注意：

①視水分多少增減配比，發(fā)酵混合物的總水分應(yīng)控制在60～65%。過高過低均不利于發(fā)酵，水過少，發(fā)酵慢；水過多會(huì)導(dǎo)致通氣差、升溫慢并產(chǎn)生臭味。水分合適與否判斷辦法：手緊抓一把物料，指縫見水印但不滴水，落地即散。

②如果按每噸添加1公斤尿素或10公斤過磷酸鈣發(fā)酵效果。

微生物菌種的作用

刺激作物生

有些微生物肥料中的微生物還可分泌植物類物質(zhì)、維生素等，刺激和調(diào)節(jié)作物生長(zhǎng)發(fā)育。例如，固氮菌等能夠產(chǎn)生多種活性物質(zhì)(生長(zhǎng)素、環(huán)己六醇、泛酸、吡哆醇、硫胺素等)，固氮菌培養(yǎng)物中可檢測(cè)到3-乙酸；熒光假單孢菌的所有菌株均能產(chǎn)生赤素和類赤素物質(zhì)，部分菌株還能產(chǎn)生乙酸，少數(shù)菌株能合成生物素和泛酸；叢枝菌根真菌能誘導(dǎo)牧草植株產(chǎn)生細(xì)胞分裂素(CTK)，改變脫落酸(ABA)與赤素的比例。