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廣州碩譜生物科技有限公司,反相SPE柱,是目前國(guó)內(nèi)生產(chǎn)SPE小柱較好的生產(chǎn)廠家。吸附型SPE柱選擇
SPE小柱相極固定比流動(dòng)相極性大的分離模式稱為正相模式。主要用途:
固相萃取材料極性表面與物極性官能團(tuán)極性相互作用;極性力比非極性力強(qiáng),但比離子力弱;常用的極性基團(tuán)有羥基,胺基,巰基等。弱極化基質(zhì)環(huán)境有利于形成極性力,因?yàn)槿鯓O化溶劑不能與極性固定相形成氫鍵功能團(tuán)。結(jié)果表明: SPE正相萃取后,樣品基質(zhì)多為弱極性,如正己烷、二氯甲i烷、菜油等,而目標(biāo)物多含有極性官能團(tuán)。常用極性固定相包括:硅膠、氧化鋁、弗羅里硅土和含有氰基(CN)、氨基(NH2)、二醇基(2 OH)的粘接硅膠。
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GP-C18通用反相色譜柱特點(diǎn):
利用高可控性的單分子層形成技術(shù)和封尾技術(shù)
*柱間重現(xiàn)率高
*選擇性和分離效i率高
適宜于分離酸性i、中性和堿性化合物,以及多種藥i物和多肽等
建議使用有i機(jī)溶劑或有i機(jī)溶劑/水系統(tǒng)的流動(dòng)相。
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由于非極性溶劑不能與極性固定相材料形成具有氫鍵的官能團(tuán),因此非極性基質(zhì)環(huán)境對(duì)吸附劑和目標(biāo)化合物之間的極性作用力是有利的。結(jié)果表明:在極性作用下,樣品的固相萃取過(guò)程中,基質(zhì)主要是正己烷、二氯甲i烷、菜油等非極性基質(zhì),而所制備的化合物多含有極性大的官能團(tuán)。
極性固定相抽提材料包括:硅膠、氧化鋁、弗羅里硅土和含有氰基(CN)、氨基(NH2)、二醇基(2 OH)的粘接硅膠。
在正相固相萃取模式中,溶劑體系的極性應(yīng)按樣品溶劑、淋洗溶劑、洗脫溶劑的順序遞增,并隨洗脫強(qiáng)度的增加而增加。要確保所選的樣本溶劑不會(huì)洗脫目標(biāo)化合物,所選的淋洗劑應(yīng)在不洗脫目標(biāo)化合物的前提下,zui大限度地洗脫干擾物,這樣,洗脫劑應(yīng)恰好洗脫目標(biāo)化合物。
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有些情況下,用有i機(jī)溶劑清洗污染的柱子是不成功的,特別是當(dāng)有金屬離子吸附到硅膠或粘合劑中時(shí):
可使用諸如0.05 M EDTA (EDTA)等鰲合劑沖洗色譜柱, EDTA可將其與許多金屬離子絡(luò)合溶解。EDTA溶液用完后,必須用足夠的水沖洗柱子。若樣品含有離子化合物,改變 pH可使其轉(zhuǎn)變?yōu)榉请x子狀態(tài),并可通過(guò)水/有i機(jī)溶劑進(jìn)行洗脫。舉例來(lái)說(shuō),在 pH低于3時(shí),強(qiáng)堿性雜質(zhì)可以被去除,在這種條件下,質(zhì)子銨水溶性更好。當(dāng) pH大于其 pKa時(shí),酸性雜質(zhì)可以被洗掉——大約是pH8或9,這時(shí),酸性雜質(zhì)是離子態(tài)。但是要注意的是,硅膠柱在長(zhǎng)時(shí)間的高 pH環(huán)境中很容易被破壞。
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防爆柱結(jié)構(gòu):
管柱:一種吸附劑載體,由級(jí)聚制成,一般呈形狀。有些制造商還提供玻璃柱用于特殊分析(例如 PAEs分析)。圓柱管端部出口尺寸已標(biāo)準(zhǔn)化,可用于不同廠家固相萃取多管真空裝置。
篩選板:對(duì)吸附液和過(guò)濾液進(jìn)行固定。聚乙烯是一種常用的篩板材料,對(duì)其進(jìn)行特殊分析還可以采用特氟隆,不銹鋼片或玻璃等材料。
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吸附劑:固體萃取柱中起分離作用的物質(zhì)。早些時(shí)候還廣泛用于柱色譜的Al2O3、 florisil、石墨化炭黑等吸附劑,現(xiàn)在仍然在固相萃取過(guò)程中使用;現(xiàn)在常見(jiàn)的吸附劑是由各種球形硅膠顆粒鍵合官能團(tuán)制得的硅膠吸附劑;上世紀(jì)后期發(fā)明的有機(jī)聚合物吸附劑,如聚二乙烯基苯-N-乙烯吡咯烷酮,已在許多應(yīng)用中取代了硅膠鍵合吸附劑。
輔助設(shè)備:儲(chǔ)樣器,增加柱管上的容器體積,提高單次上樣量;適配器,將柱管和柱管、柱管和儲(chǔ)樣器連接起來(lái)。
當(dāng)選用柱狀規(guī)格時(shí),必須考慮到目標(biāo)化合物和在萃取條件下可能吸附的總干擾物,而不僅僅是目標(biāo)化合物。另外,即使目標(biāo)化合物未超過(guò)柱容量, SPE柱在保留目標(biāo)化合物的同時(shí)也保留了部分干擾物,由于兩者的總量已超過(guò)柱容量,其結(jié)果必然是部分目標(biāo)化合物無(wú)法保留在 SPE柱中。
預(yù)處理溶劑和參數(shù)的選?。?
確定預(yù)處理 SPE柱所用溶劑及其用量和流速,并進(jìn)行平衡。在反相或離子交換柱中,通常以或極性為預(yù)處理溶液,以水或緩沖溶液為平衡溶液。
樣本過(guò)柱流速度的選擇:下一步是確定樣品通過(guò) SPE柱流動(dòng)速度。過(guò)柱流速與 SPE試樣中填充物的粒徑分布、填充物的填充密度、目標(biāo)化合物與試樣基質(zhì)的結(jié)合程度、試樣的粘度等因素有關(guān)。