等溫核酸試劑盒

核酸試劑盒的原理

核酸檢測，其實就是通過檢測熒光信號的累積來確定樣本中是否有病毒核酸?，F(xiàn)在核酸檢測試劑盒（多重熒光RT-PCR法），能夠?qū)崿F(xiàn)一小時快速診斷。

根據(jù)銳科技發(fā)布的文章《如何進行核酸檢測帶你揭秘全過程》，目前的病毒核酸檢測試劑盒，多數(shù)采用熒光定量PCR方法。檢測原理是以病毒的基因序列為檢測靶標，通過PCR擴增，使我們的選擇這段靶標DNA序列指數(shù)級增加，每一個擴增出來的DNA序列，都可與我們預(yù)先加入的一段熒光標記探針結(jié)合，產(chǎn)生熒光信號，擴增出來的靶基因越多，累計的熒光信號就越強。

如何提高擴增曲線的可重復(fù)性?

優(yōu)化擴增曲線考慮以下因素: 對于低拷貝數(shù)模板，不穩(wěn)定擴增可能是因為達到檢測限或者是反應(yīng)混勻程度不同（未混勻的反應(yīng)擴增效率不佳）。另外，在低溫情況下存貯，重組酶和輔助蛋白在50%甘油情況下形成沉淀,也是可能導(dǎo)致不穩(wěn)定擴增的原因。所以，20x核心反應(yīng)mix在室溫下解凍并震蕩渦旋將使其成為液體，不影響其功能,并且有效提高擴增效率。不穩(wěn)定擴增也可能是因為master mix量不足，在加入體系前，用戶必須保證震蕩后20x核心反應(yīng)組分均一。

近年來，等溫擴增方法的發(fā)展讓基因檢測得以擺脫熱循環(huán)儀器的使用，因此更加便捷化?；诘葴財U增方法，多種具有POCT潛力的SARS-CoV-2檢測技術(shù)得以開發(fā)出來。特別是結(jié)合CRISPR技術(shù)后，檢測的特異性和靈敏度得到了進一步提升。盡管如此，幾乎所有這些報道的技術(shù)僅僅證明了其在單基因檢測中的應(yīng)用。然而，臨床認可的金標準方法，如RT-qPCR，通常需要檢測兩個基因。因為雙基因檢測能夠有效地避免因基因部分降解，基因拷貝數(shù)差異和擴增錯誤等引起的潛在假陰性結(jié)果。

距離新冠疫情發(fā)生已經(jīng)近4個月了，不少科研工作者都積極投身到了新冠的相關(guān)研究當中……

試紙條是一款基于側(cè)向?qū)游黾夹g(shù)和膠體金標記技術(shù)的即用型快速檢測試紙條。該款試紙條可用于蛋白、基因擴增產(chǎn)物（PCR，LAMP，RPA）的定性/半定量檢測。研究者需要自行設(shè)計分別標記有生物素的特異性檢測物（如抗原、探針）和標記有FITC的特異性檢測物（如探針）。