廣州碩譜生物科技有限公司吸附型SPE柱分類(lèi)

反相態(tài)是 SPE小柱中相對(duì)于流動(dòng)相極性較低的分離態(tài)。本發(fā)明主要利用固定相官能團(tuán)的碳?xì)滏I和目標(biāo)化合物的碳?xì)滏I之間的非極性作用力，適合從極性基質(zhì)中提取分離非極性和中極性的目標(biāo)物。

對(duì)由非極性力吸附到反相 SPE柱上的目標(biāo)物，可用弱極性溶劑洗脫，如氯1仿、環(huán)1己烷、乙1酸乙酯等。只有當(dāng)溶劑的洗脫強(qiáng)度足夠大時(shí)，才能使目標(biāo)物與吸附劑之間的范德華力破壞，使目標(biāo)物從 SPE柱洗脫。即使是極性更強(qiáng)的甲1醇，對(duì)許多化合物而言，也有足夠的非極性力量來(lái)洗脫它。有時(shí)候，單種溶劑無(wú)法徹底洗脫疏水性強(qiáng)的目標(biāo)物，可以考慮使用二氯1甲1烷：乙1酸1乙酯(1:1，體積比)。在實(shí)際操作中，為了滿足前兩個(gè)條件，確保99%以上的目標(biāo)化合物及固相萃取吸附劑上的官能團(tuán)能夠呈離子態(tài)或呈中性狀態(tài)，應(yīng)該根據(jù)目標(biāo)化合物及固相萃取吸附劑官能團(tuán)的pKa來(lái)調(diào)節(jié)樣品或SPE柱的pH。

MIP-BAP苯并芘小柱

領(lǐng)域：食品（油類(lèi)）

分子印跡小柱的實(shí)力擔(dān)當(dāng)。適用于脂肪和乳化脂肪制品等幾乎所有食品基質(zhì)，能有效的除去油脂干擾，回收率高、穩(wěn)定性好。

主要作品：

? 各種植物油中苯并芘的檢測(cè)

? 水產(chǎn)品苯并芘的檢測(cè)

? 乳化脂肪制品苯并芘的檢測(cè)

? 谷物制品苯并芘的檢測(cè)

? 熏烤肉類(lèi)基質(zhì)中苯并芘檢測(cè)

離子交換固相萃取小柱方法開(kāi)發(fā)中需要注意的問(wèn)題。

離子交換固相萃取適用于可解離成帶電離子的化合物，其機(jī)理是利用帶電荷的目標(biāo)化合物離子與帶相反電荷的吸附劑之間的靜電吸引力。樣品基質(zhì)可以是極性的，如水溶液，也可以是非極性的有機(jī)溶液，但在實(shí)際應(yīng)用中以水溶液較多，包括生物體液、江河湖海等自然水、廢水等。廣州碩譜生物科技有限公司吸附型SPE柱分類(lèi)固相萃取技術(shù)的復(fù)雜、難搞也是人所共知，下面列舉了一些固相萃取操作中的常見(jiàn)的問(wèn)題及解決辦法，希望能對(duì)你的固相萃取操作有所幫助。

常見(jiàn)反相鍵合硅膠吸附劑的類(lèi)型

C18柱

C18是目前使用zui多的一種SPE柱，根據(jù)2003年的一項(xiàng)統(tǒng)計(jì)，在所有使用

的SPE柱中，C18柱占了56％左右。C18柱的主要官能團(tuán)是十八烷基( octade-cyl),其主要作用力是非極性，第二作用力是極性、陽(yáng)離子交換。在所有鍵合硅

膠SPE吸附劑中，C18柱的非極性吸附能力zui強(qiáng)。因此，強(qiáng)非極性化合物被C18

吸附后可能較難洗脫。C18難吸附極性非常強(qiáng)的分子，如碳水化合物( carbohy

-drates).C18一般被當(dāng)作zui沒(méi)有選擇性或通用型的吸附劑，因?yàn)榻^大多數(shù)有機(jī)分子或多或少含有非極性基團(tuán)，C18可以從水溶液中吸附這些有機(jī)化合物。因此C18對(duì)于同時(shí)分離不同結(jié)構(gòu)的化合物時(shí)較為適用。由于C18的選擇性較低，其zui終萃取物往往沒(méi)有其他選擇性高的填料那么干凈。在蛋白質(zhì)純化中，C18柱是優(yōu)1秀的除鹽工具，因?yàn)闃悠分械柠}在C18柱上沒(méi)有保留。C18的極性副作用力比其他鍵合硅膠SPE吸附劑低許多，主要是碳鏈較長(zhǎng)的原因。32-2016食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中9種抗1氧化劑的測(cè)定》SPE法原理油樣用乙1腈提取，固相萃取柱凈化。

那么面對(duì)反相、正相固相萃取，在實(shí)際應(yīng)用中我們?cè)撨x哪一個(gè)

鑒于大部分化合物都具有多種功能基團(tuán)，在實(shí)際操作中，主要根據(jù)目標(biāo)物和干擾物的性質(zhì)考慮采用何種萃取機(jī)理。例如：2-萘胺為弱堿性化合物(pKa=4.16)，在一定 pH條件下可呈陽(yáng)離子化狀態(tài)，同時(shí)又具有疏水和親水基。此時(shí)可根據(jù)樣品基質(zhì)選擇有利于目標(biāo)物與干擾物分離的萃取機(jī)理。在目標(biāo)物處于極性較弱的樣品基質(zhì)中時(shí)，可利用極性相互作用，選擇正相萃取方式；離子交換固相萃取適用于可解離成帶電離子的化合物，其機(jī)理是利用帶電荷的目標(biāo)化合物離子與帶相反電荷的吸附劑之間的靜電吸引力。而在極性樣品環(huán)境下，則可采用反相萃取方式。采用陽(yáng)離子交換機(jī)制，可將萃取過(guò)程中 pH調(diào)至低于目標(biāo)物 pKa的兩個(gè) pH單位，即 pH=2.16。影響保留機(jī)制選擇的主要因素總結(jié)如下：

保留機(jī)制di一影響因素：目標(biāo)物官能團(tuán)的性質(zhì)

保留機(jī)制第二影響因素：樣品基質(zhì)的性質(zhì)

網(wǎng)上關(guān)于柱子是否能反沖一直有爭(zhēng)議，那是什么樣的柱子能反沖，什么不能。反沖之后，則為正者，或逆者。具體地說(shuō)，每一種類(lèi)型的柱子不只是 ODS柱，其他如正柱，氨基柱，離子交換柱等zui好解釋清楚。

答：一般正反相的柱子應(yīng)該都能反沖，只有兩端篩板孔徑不對(duì)稱(chēng)的柱子才不能反沖，不過(guò)目前這種柱子已經(jīng)比較少見(jiàn)了。反向沖刷是為了沖刷掉柱頭上的污物，反向沖刷后還是要正著使用，以免兩個(gè)柱頭被污染。我們一貫主張：前向使用，后向沖洗。

固相萃?。⊿PE）技術(shù)是目前十分常見(jiàn)的樣品前處理方法，廣泛應(yīng)用于食品、環(huán)境、生物樣品等諸多領(lǐng)域的檢測(cè)。在規(guī)格種類(lèi)繁多的固相萃取柱（SPE小柱）中，聚乙烯吡咯烷酮基質(zhì)SPE(如常見(jiàn)的HLB小柱)占有重要一席。

這類(lèi)基質(zhì)具有良好的水可浸潤(rùn)性和化學(xué)穩(wěn)定性，表面同時(shí)具有親水性和疏水性官能團(tuán)，從而對(duì)各類(lèi)極性、非極性化合物具有均衡的吸附作用。其吸附能力大，樣品容量高，對(duì)大部分有機(jī)物的吸附容量增大，回收率也更高，且在吸附后有機(jī)物容易被定量洗脫。

固相萃取柱的預(yù)處理

在萃取樣品之前，吸附劑必須經(jīng)過(guò)適當(dāng)?shù)念A(yù)處理，一足為了潤(rùn)濕和活化固相萃取填料，以使目標(biāo)萃取物與固相表面緊密接觸，易于發(fā)生分子間相互作用；二是為了除去填料中可能存在的雜質(zhì)．減少污染。采取的方法是用一定量溶劑沖洗萃取柱。

反相類(lèi)型的固相萃取硅膠和非極性吸附劑介質(zhì)，通常用水溶性有機(jī)1溶劑如甲1醇預(yù)處理，甲1醇潤(rùn)濕吸附劑表面和滲透鍵臺(tái)烷1基相，便于水更有效地潤(rùn)濕硅膠表面。然后用水或緩沖溶液替換滯留在柱中的甲1醇，以使樣品水溶液與吸附劑表面有良好的接觸，提高萃取效率。正相類(lèi)型的固相萃取硅膠和極性吸附劑介質(zhì)，通常用樣品所在的有機(jī)1溶劑來(lái)預(yù)處理。離子交換填料一般用3—5ml。必須保證選擇的樣品溶劑不能將目標(biāo)物洗脫，選擇的淋洗液應(yīng)在不洗脫目標(biāo)物的前提下zui大限度地洗脫干擾物，所以洗脫液應(yīng)能恰好完全洗脫目標(biāo)物。去離子水或低濃度的離子緩沖溶液來(lái)預(yù)處理。