{微生物檢測}{微生物限度}

——微生物限度檢驗量——

檢驗量檢驗量即一次試驗所用的供試品量(g、ml 或c㎡)。

除另有規(guī)定外，一般供試品的檢驗量為10g 或10ml;膜劑為100c㎡;貴重藥品、微量包裝藥品的檢驗量可以酌減。要求檢查沙門菌的供試品，其檢驗量應增加20g 或20ml(其中10g或者10ml 用于陽性對照試驗)。

檢驗時，應從2 個以上xiao包裝單位中抽取供試品，大蜜丸還不得少于4丸，膜劑還不得少于4 片。

一般應隨機抽取不少于檢驗用量(兩個以上xiao包裝單位)的3 倍量供試品。

抑菌效力

抑菌劑效力可能受試驗用容器特征的影響，如容器的材質、性狀、體積及封口的方式等。因此，只要供試品每個包裝容器的裝量足夠試驗用，同時容器便于按無菌操作技術接入試驗菌液、混合及取樣等，一般應將試驗菌直接接種于供試品原包裝容器中進行貯存。2、涂布平板法首先把微生物懸液通過適當的稀釋，取一定量的稀釋液放在無菌的已經凝固的營養(yǎng)瓊脂平板上，然后用無菌的玻璃guadao把稀釋液均勻地涂布在培養(yǎng)基表面上，經恒溫培養(yǎng)便可以得到單個菌落。若因供試品的性狀或每個容器裝量等因素需將供試品轉移至無菌容器時，該容器的材質不得影響供試品的特性（如吸附作用），特別應注意不得影響供試品的PH，PH對抑菌劑的活性影響很大，同時容器的口徑大小應便于供試品的進出及混勻。

微生物限度檢查

1.平皿法

   平皿法包括傾注法和涂布法。除另有規(guī)定外，取規(guī)定量供試品，按方法適用性試驗確認的方法進行供試液制備和菌數測定，每稀釋級每種培養(yǎng)基至少制備2個平板。

   培養(yǎng)和計數 除另有規(guī)定外，胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基平板在30～35℃培養(yǎng)3～5天，沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基平板在20～25℃培養(yǎng)5～7天，觀察菌落生長情況，點計平板上生長的所有菌落數，計數并報告。菌落蔓延生長成片的平板不宜計數。點計菌落數后，計算各稀釋級供試液的平均菌落數，按菌數報告規(guī)則報告菌數。檢驗結果以1g、1ml、10g、10ml、10c㎡為單位報告，特殊品種可以最xiao包裝單位報告。若同稀釋級兩個平板的菌落數平均值不小于15，則兩個平板的菌落數不能相差1倍或以上。

   菌數報告規(guī)則 需氧菌總數測定宜選取平均菌落數小于300cfu的稀釋級、霉菌和酵母菌總數測定宜選取平均菌落數小于100cfu的稀釋級，作為菌數報告的依據。取zui高的平均菌落數，計算1g、1ml或10c㎡供試品中所含的微生物數，取兩位有效數字報告。38-2012食品安全標準食品微生物學檢驗大腸埃希氏菌計數GB4789。

   如各稀釋級的平板均無菌落生長，或僅zui低稀釋級的平板有菌落生長，但平均菌落數小于1 時，以<1 乘以zui低稀釋倍數的值報告菌數。

   各品種項下規(guī)定的微生物限度標準解釋如下：

   10^1cfu：可接受的zui大菌數為20；

   10^2cfu：可接受的zui大菌數為200；

   10^3cfu：可接受的zui大菌數為2000，依此類推。

   若供試品的需氧菌總數、霉菌和酵母菌總數的檢查結果均符合該品種項下的規(guī)定，判供試品符合規(guī)定；若其中任何一項不符合該品種項下的規(guī)定，判供試品不符合規(guī)定。

   稀釋液、沖洗液及培養(yǎng)基

   見非無菌產品微生物限度檢查：控制菌檢查法（通則1106）。