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組合形式PCR實驗室設(shè)計中的一些經(jīng)驗：

試劑配制室及樣品處理室宜呈微正壓，以防外界含核酸氣溶膠的空氣進(jìn)入，造成污染;

可以通過控制進(jìn)風(fēng)風(fēng)量大于排風(fēng)風(fēng)量達(dá)到正壓效果;

核酸擴(kuò)增室及產(chǎn)物分析室應(yīng)呈微負(fù)壓，以防含核酸的氣溶膠擴(kuò)散出去污染試劑與樣品，可以通過控制排風(fēng)風(fēng)量大于進(jìn)風(fēng)風(fēng)量達(dá)到負(fù)壓效果;

在理想情況下，PCR實驗室緩沖間應(yīng)該設(shè)置正壓模式，使室內(nèi)空氣不流向室外，室外空氣不流向室內(nèi)。 PCR實驗室進(jìn)風(fēng)由原有空調(diào)控制，要求將空調(diào)風(fēng)口安裝到定點，且高度為地面鋪裝好后2600毫米處。

PCR實驗室設(shè)計時，應(yīng)該讓墻壁和天花板具有牢固的結(jié)構(gòu)和良好的氣密性;所有內(nèi)角應(yīng)采用圓弧線過渡;墻體內(nèi)壁光滑，不吸附，耐腐蝕，易于清洗消毒;地面材料應(yīng)滿足無縫隙、無滲漏、光滑、耐腐蝕的要求。

工廠實驗室裝修

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標(biāo)本制備區(qū)

該區(qū)域主要進(jìn)行的操作為臨床標(biāo)本的保存、核酸(RNA、DNA)提取、貯存及其加入至擴(kuò)增反應(yīng)管和測定RNA時cDNA的合成。

標(biāo)本制備區(qū)配備有2~8°C冰箱和-20°C冰箱，計算冷負(fù)荷時，需要將它們計算在內(nèi)。在標(biāo)本制備區(qū)，還需要配備生物安全柜，用于進(jìn)行提取核酸的操作。

為避免提取的核酸在柜內(nèi)反復(fù)循環(huán)，造成標(biāo)本之間的交叉污染，出現(xiàn)假陽性結(jié)果，該區(qū)域配備的生物安全柜必須是B2型的。生物安全柜工作區(qū)垂直氣流全部來自實驗室，排風(fēng)經(jīng)過過濾器過濾后直接排至室外，不允許回到安全柜和實驗室中。

根據(jù)經(jīng)驗，如果實驗室內(nèi)配備生物安全柜，每配備一臺，實驗室的面積增加10㎡；標(biāo)本制備區(qū)的面積宜在25㎡~30㎡之間。本區(qū)的壓力梯度要求為：相對于鄰近區(qū)域為正壓，以避免從鄰近區(qū)進(jìn)入本區(qū)的氣溶膠污染。

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PCR實驗的污染來源都有哪些？

樣本間交叉污染：收集樣本的容器被污染或樣本密封不嚴(yán)導(dǎo)致外溢；不同樣本移液時忘記更換槍尖或未使用帶濾芯槍尖；移液器等實驗器具及耗材未及時消毒滅菌；不同樣本同時開蓋或樣本劇烈震蕩、反復(fù)吹吸導(dǎo)致氣溶膠形成擴(kuò)散，相互交叉污染。

實驗試劑污染：主要是在 PCR 組分試劑加樣過程中，由于移液器、容器、陰性對照及其它試劑被核酸模板或陽性對照污染。加樣過程中，因為PCR試劑對溫度十分敏感，需要通過冰浴使得PCR試劑和PCR板/管處于0℃，但這個過程也充滿污染風(fēng)險。

擴(kuò)增產(chǎn)物污染：大量拷貝的產(chǎn)物泄漏或擴(kuò)增后的PCR反應(yīng)管意外開蓋，這是PCR反應(yīng)中主要、常見的污染問題。因為PCR產(chǎn)物拷貝量大，遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于PCR檢測數(shù)個拷貝的極限，所以極微量的PCR產(chǎn)物污染，就可形成假陽性。

如何設(shè)計一個合格的PCR實驗室？

基因擴(kuò)增實驗又稱PCR實驗，其特點是能將微量的DNA大幅加，PCR是分子生物學(xué)研究和實驗的常規(guī)方法，廣泛應(yīng)用于生物學(xué)各個領(lǐng)域，例如:檢驗禽疫病、癌基因的檢測和診斷，DNA指紋、個體識別、親子鑒別及法醫(yī)物證，動、植物檢疫，動物及其衍生產(chǎn)品檢測，動物飼料、化妝品、食品衛(wèi)生檢測，轉(zhuǎn)基因作物及轉(zhuǎn)基因微生物檢測等。

結(jié)合時勢，疫情需要，通過對實驗室的使用場景對以及現(xiàn)有拼裝實驗室的現(xiàn)狀及調(diào)研，結(jié)合我公司產(chǎn)品的技術(shù)優(yōu)勢，我們擬定了移動式PCR核酸檢測實驗室的技術(shù)方案。移動式PCR核酸檢測實驗室是裝載專用設(shè)備和人員，并提供所需要的工作條件和環(huán)境防護(hù)的可移動廂體。對車、船、直升機(jī)吊裝等運輸方式適應(yīng)性較強(qiáng)，轉(zhuǎn)場方便靈活，機(jī)動性強(qiáng)，隱蔽性好，布展迅速，艙內(nèi)工作人員和艙載設(shè)備能得到有效保護(hù)，因此廣泛應(yīng)用于救護(hù)、公共衛(wèi)生檢測、通信指揮、裝備維修檢測、生活保障、移動供電、無人值守機(jī)房等各個軍、民用領(lǐng)域。