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PCR實驗室試劑的操作:
⑴所用的所有溶液都應該沒有核酸和(或)核酸酶(DNase和RNase)污染。
⑵所有PCR試劑中使用的水都應該是高質量的-新鮮蒸餾的去離子水,用0.22μm過濾的,并且是高壓滅菌。
⑶在20℃到25℃貯存的試劑建議加點像疊氮鈉一類的抗微生物劑,在擴增試劑或樣品制備試劑中加入0.025%的疊氮鈉不抑制擴增反應。⑷所用試劑都應該以大體積配制,實驗一下看試劑是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量進行貯存。
⑸所有試劑和樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的瓶子和管子。
⑹新配制的試劑在用于準備新的標本之前應該加以檢驗。
⑺樣品準備和前PCR區(qū)所使用的移液管在不使用時都應該小心保存。
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對于全新的空調機組,在進氣口處安裝一個鋁制過濾網(wǎng),應至少每周清潔一次。在pcr實驗室凈化中,如果絮狀物和灰塵漂浮,它們應該每周清洗兩次。在拉出鋁網(wǎng)之前,需要關閉新鮮空氣裝置,清潔后的過濾器只有在干燥后才能安裝。在聚合酶鏈反應純化過程中,檢查風機冷凝水管道是否堵塞,氣封中是否有積水。風扇表面冷卻器下方有一個集水盤,用于接收冷凝水,冷凝水通過帶空氣密封的管道排放到地漏處。
如果在pcr純化過程中排水冷凝管被堵塞,水將在機柜中積聚,這將導致細菌繁殖并影響純化效果??諝饷芊獾墓δ苁欠乐古潘芡獾目諝馔ㄟ^排水管彎頭處積聚的水回流到類似于風扇中的洗滌池的水封,這可用于防止臭氣溢出。因此,在pcr實驗室的凈化過程中,當冬季沒有冷凝水時,應注意檢查氣封中積聚的水是否干燥,如果干燥,應及時加入清水,使其保持水封狀態(tài)。