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組合形式PCR實驗室設計中的一些經驗：

試劑配制室及樣品處理室宜呈微正壓，以防外界含核酸氣溶膠的空氣進入，造成污染;

可以通過控制進風風量大于排風風量達到正壓效果;

核酸擴增室及產物分析室應呈微負壓，以防含核酸的氣溶膠擴散出去污染試劑與樣品，可以通過控制排風風量大于進風風量達到負壓效果;

在理想情況下，PCR實驗室緩沖間應該設置正壓模式，使室內空氣不流向室外，室外空氣不流向室內。 PCR實驗室進風由原有空調控制，要求將空調風口安裝到定點，且高度為地面鋪裝好后2600毫米處。

PCR實驗室設計時，應該讓墻壁和天花板具有牢固的結構和良好的氣密性;所有內角應采用圓弧線過渡;墻體內壁光滑，不吸附，耐腐蝕，易于清洗消毒;地面材料應滿足無縫隙、無滲漏、光滑、耐腐蝕的要求。

工廠實驗室裝修

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標本制備區(qū)

該區(qū)域主要進行的操作為臨床標本的保存、核酸(RNA、DNA)提取、貯存及其加入至擴增反應管和測定RNA時cDNA的合成。

標本制備區(qū)配備有2~8°C冰箱和-20°C冰箱，計算冷負荷時，需要將它們計算在內。在標本制備區(qū)，還需要配備生物安全柜，用于進行提取核酸的操作。

為避免提取的核酸在柜內反復循環(huán)，造成標本之間的交叉污染，出現(xiàn)假陽性結果，該區(qū)域配備的生物安全柜必須是B2型的。生物安全柜工作區(qū)垂直氣流全部來自實驗室，排風經過過濾器過濾后直接排至室外，不允許回到安全柜和實驗室中。

根據經驗，如果實驗室內配備生物安全柜，每配備一臺，實驗室的面積增加10㎡；標本制備區(qū)的面積宜在25㎡~30㎡之間。本區(qū)的壓力梯度要求為：相對于鄰近區(qū)域為正壓，以避免從鄰近區(qū)進入本區(qū)的氣溶膠污染。

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PCR實驗的污染來源都有哪些？

樣本間交叉污染：收集樣本的容器被污染或樣本密封不嚴導致外溢；不同樣本移液時忘記更換槍尖或未使用帶濾芯槍尖；移液器等實驗器具及耗材未及時消毒滅菌；不同樣本同時開蓋或樣本劇烈震蕩、反復吹吸導致氣溶膠形成擴散，相互交叉污染。

實驗試劑污染：主要是在 PCR 組分試劑加樣過程中，由于移液器、容器、陰性對照及其它試劑被核酸模板或陽性對照污染。加樣過程中，因為PCR試劑對溫度十分敏感，需要通過冰浴使得PCR試劑和PCR板/管處于0℃，但這個過程也充滿污染風險。

擴增產物污染：大量拷貝的產物泄漏或擴增后的PCR反應管意外開蓋，這是PCR反應中主要、常見的污染問題。因為PCR產物拷貝量大，遠遠高于PCR檢測數個拷貝的極限，所以極微量的PCR產物污染，就可形成假陽性。

如何設計一個合格的PCR實驗室？

基因擴增實驗又稱PCR實驗，其特點是能將微量的DNA大幅加，PCR是分子生物學研究和實驗的常規(guī)方法，廣泛應用于生物學各個領域，例如:檢驗禽疫病、癌基因的檢測和診斷，DNA指紋、個體識別、親子鑒別及法醫(yī)物證，動、植物檢疫，動物及其衍生產品檢測，動物飼料、化妝品、食品衛(wèi)生檢測，轉基因作物及轉基因微生物檢測等。

結合時勢，疫情需要，通過對實驗室的使用場景對以及現(xiàn)有拼裝實驗室的現(xiàn)狀及調研，結合我公司產品的技術優(yōu)勢，我們擬定了移動式PCR核酸檢測實驗室的技術方案。移動式PCR核酸檢測實驗室是裝載專用設備和人員，并提供所需要的工作條件和環(huán)境防護的可移動廂體。對車、船、直升機吊裝等運輸方式適應性較強，轉場方便靈活，機動性強，隱蔽性好，布展迅速，艙內工作人員和艙載設備能得到有效保護，因此廣泛應用于救護、公共衛(wèi)生檢測、通信指揮、裝備維修檢測、生活保障、移動供電、無人值守機房等各個軍、民用領域。