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江蘇玉米赤霉烯酮ELISA試劑盒公司服務(wù)放心可靠「中檢維康」

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發(fā)布時間:2021-08-01 12:58  






ELISA試劑盒的組成結(jié)構(gòu)

1、 操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血紅細(xì)胞迅速小心地分離。

2、 血漿:EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。

3、 細(xì)胞上清液:1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4、 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液。

5、 保存:如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

此IBL試劑盒能用于小鼠清,EDTA血漿,細(xì)胞上清中白介素-6的定量檢測。



ELISA試劑盒——ELISA實驗通用規(guī)則

1、溫浴時,要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā)。

2、洗板時,每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加徹底。倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報紙或毛紙上用力拍干。
3、洗液不夠時,可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
4、底物是光敏感的,要在臨用前現(xiàn)配。
5、檢測前,要打開酶標(biāo),使之穩(wěn)定10分鐘以上。
6、底物有一定的毒性,終止液對皮膚有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸。
7、待檢樣品要澄清,否則會影響結(jié)果。
8、溫浴時間應(yīng)遵守試劑盒規(guī)定。
9、應(yīng)盡量做雙孔實驗,這樣才能保證數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。
10、對結(jié)果有疑問的樣品要用其它方法進(jìn)行確證。



Elisa試劑盒的注意事項

Elisa試劑盒是否滅活:加熱可滅清中補體系統(tǒng),在較少數(shù)情況下(培養(yǎng)ES細(xì)胞,平滑肌細(xì)胞時)建議滅活,在培養(yǎng)其余細(xì)胞時不建議滅清。滅活非常容易產(chǎn)生沉淀,如必須滅活請按56℃,30 min,輕微搖晃原則操作,滅活溫度高、時間長、搖晃不均都容易產(chǎn)生沉淀。

Elisa試劑盒培養(yǎng)基:無培養(yǎng)基在結(jié)果重復(fù)性、細(xì)胞體外分化方面有優(yōu)勢,但是,仍然是培養(yǎng)液中基本的添加物,尤其是在原代培養(yǎng)或細(xì)胞生長狀態(tài)不良時,常常會先使用有的培養(yǎng)液進(jìn)行培養(yǎng),待細(xì)胞生長旺盛后再換成培養(yǎng)液。



Elisa試劑盒——Elisa實驗常見問題及解決方案

不正常的標(biāo)準(zhǔn)曲線

1  錯誤的方法重懸標(biāo)準(zhǔn)品  加入正確量的溶液重懸標(biāo)準(zhǔn)品,重懸充分

2  標(biāo)準(zhǔn)品稀釋錯誤  按照說明書要求稀釋標(biāo)準(zhǔn)品

3  標(biāo)準(zhǔn)品污染  使用一次性的滅菌吸頭, 標(biāo)準(zhǔn)品貯存于2-8 ℃

4  錯誤的倍比稀釋步驟  按照說明書倍比稀釋標(biāo)準(zhǔn)品

5  波長選擇錯誤 TMB為底物和以O(shè)PD為底物的試劑盒均有使用,而 前者比色波長為450nm,后者為492nm。雙波長比色分析優(yōu)于單波長。

6  標(biāo)準(zhǔn)品混用  不同批號試劑勿混用

7  試劑盒在運輸途中時間太長,溫度太高,標(biāo)準(zhǔn)品失活  盡量縮短運輸時間,夏季應(yīng)放冰塊降溫

8  ELISA未終止而直接檢測450nm和620nm TMB顯色需終止后檢測,否則會出現(xiàn)620nm比450nm讀數(shù)高的現(xiàn)象。(數(shù)值仍有梯度規(guī)律)



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