制備液相色譜的作用

由于液相色譜儀的溶質(zhì)分子在流動相、靜態(tài)流動相和固定相中的傳質(zhì)過程而導(dǎo)致的峰展寬。溶質(zhì)分子在流動相和固定相中的擴(kuò)散、分配、轉(zhuǎn)移的過程并不是瞬間達(dá)到平衡,實際傳質(zhì)速度是有限的,這一時間上的滯后使色譜柱總是在非平衡狀態(tài)下工作,從而產(chǎn)生峰展寬.液相色譜儀的靈敏度高,分析速度快,操作方便等優(yōu)點,但是受技術(shù)條件的限制,沸點太高的物質(zhì)或熱穩(wěn)定性差的物質(zhì)都難于應(yīng)用氣相色譜法進(jìn)行分析。而液相色譜法,只要求試樣能制成溶液,而不需要氣化,因此不受試樣揮發(fā)性的限制。

使用外力使含有樣品的流動相通過一固定于柱中或平板上、與流動相互不相溶的固定相表面.當(dāng)流動相中攜帶的混合物流經(jīng)固定相時,混合物中的各組分與固定相發(fā)生相互作用。 由于混合物中各組分在性質(zhì)和結(jié)構(gòu)上的差異,與固定相之間產(chǎn)生的作用力的大小、強(qiáng)弱不同,隨著液相色譜儀中流動相的移動,混合物在兩相間經(jīng)過反復(fù)多次的分配平衡,使得各組分被固定相保留的時間不同,從而按一定次序由固定相中先后流出。與適當(dāng)?shù)闹髾z測方法結(jié)合,實現(xiàn)混合物中各組分的分離與檢測。

液相色譜不是堵就是漏，原因很簡單！

使用液相色譜儀的小伙伴肯定會遇到漏氣和漏液的狀況，流動相是造成液相色譜各種問題的主要源頭。液相色譜常見的故障一是堵，二是漏。今天就這兩部分別展開討論 。首先，為何會堵?“堵”的表現(xiàn)現(xiàn)象就是柱壓異常升高，直接原因就是流路不暢。堵塞的主要位置就是在色譜柱的前端，主要原因就是流動相里有雜質(zhì)，雜質(zhì)的主要來源就是細(xì)菌。

制備液相色譜原理    

英文名稱 preparative liquid chromatograph，即將分析色譜的進(jìn)樣量增大，同時得出大量的所需物質(zhì)（餾分）的過程，其目的是從混合物中得到純物質(zhì)。

制備液相色譜是指采用液相色譜技術(shù)制備純物質(zhì)，即分離、收集一種或多種色譜純物質(zhì)。制備液相色譜中的“制備”這一概念指獲得足夠量的單一化合物，以滿足研究和其它用途。制備液相色譜的出現(xiàn)，使液相色譜技術(shù)與經(jīng)濟(jì)利益建立了聯(lián)系。制備量大小和成本高低是制備液相色譜的兩個重要指標(biāo)。

液相色譜儀

20世紀(jì)初在俄國的波蘭植物化學(xué)家茨維特（Twseet）首先將植物提取物放入裝有碳酸鈣的玻璃管中，植物提取液由于在碳酸鈣中的流速不同分布不同，因此在玻璃管中呈現(xiàn)出不同的顏色，這樣就可以對各種不同的植物提取液進(jìn)行有效的成分分離。

1941年，馬丁與辛格用一根裝滿硅膠微粒的色譜柱，完成了乙酰化氨基的分離，開啟了液色譜技術(shù)，因此獲得諾貝爾化學(xué)獎。1949年，馬丁建立了色譜保留值與熱力學(xué)常數(shù)之間的關(guān)系，奠定了物化色譜的基礎(chǔ)；1952年，馬丁與辛格又創(chuàng)立了氣液色譜法，分離了脂肪酸與脂肪胺。1966年之前科學(xué)家所做的努力，為傳統(tǒng)經(jīng)典液相色譜奠定了基礎(chǔ)。

而液相色譜儀的鼻祖則是由斯坦因與莫爾于1958年設(shè)計的氨基酸分析儀，這種儀器能夠分蛋白質(zhì)水解的產(chǎn)物。首臺商用LC則是由沃特斯公司制造。

1971年之后，液相色譜技術(shù)得到了飛速的發(fā)展，HPLC的分析體制也逐步完善。到了二十世紀(jì)八十年代中期，液相色譜技術(shù)已經(jīng)非常非常成熟，激動人心的新發(fā)展日趨減少，人們開始轉(zhuǎn)向相關(guān)領(lǐng)域發(fā)展，如超臨界色譜、毛管電泳色譜、制備色譜等。