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超級(jí)制備色譜系統(tǒng)
問(wèn):TFA在緩沖液中是不是只起到調(diào)節(jié)pH的作用呢?TFA的濃度越高基線的漂移越厲害,那是不是說(shuō)它的濃度在緩沖液pH允許的情況下越低越好呢?
答:(1)TFA起到類似離子對(duì)的作用,一般濃度在0.05-0.1%,過(guò)高的濃度,會(huì)使溶液偏酸,長(zhǎng)時(shí)間使用可能影響柱子壽命。
(2)同時(shí)TFA可以抑制硅膠表面硅醇基,改善堿性化合物的峰型。有時(shí)0.1%TFA分離不好的話??梢钥紤]加大濃度到0.2%。但要注意用完后及時(shí)沖洗色譜柱。
(3)走梯度時(shí),因?yàn)樽叱苫€漂移,但對(duì)制備的影響不大。
制備色譜柱子由于處理的樣品多,比分析柱子更容易受污染,所以,必要的前處理就顯得非常的必要。萃取、過(guò)濾、結(jié)晶、固相萃取等簡(jiǎn)單的分離方法,如果用得上,而且還不是很麻煩,就要盡可能多的采用以去掉雜質(zhì)。固定相的選擇硅膠、鍵合固定相(如C18)、離子交換樹(shù)脂、聚酰胺、氧化鋁、凝膠等都可以作為色譜柱的填料。 有不少文獻(xiàn)報(bào)道,對(duì)填料可以進(jìn)行一下處理提高了分離效果,如,對(duì)硅膠進(jìn)行的(或緩沖液)處理。
超載、邊緣切割、中心切割、放大技術(shù)與非線性效用
在制備色譜中,因?yàn)闆](méi)有必要達(dá)到分析色譜那樣的分離度,可以在一定范圍內(nèi)大大加大進(jìn)樣的濃度和體積。在做分離的時(shí)候,也有一些分析色譜的時(shí)候,不能用到的技巧。因?yàn)槠P(guān)系,不在這里敘述。
柱轉(zhuǎn)換技術(shù)
通過(guò)接頭或者閥門(mén),實(shí)現(xiàn)柱子的簡(jiǎn)單延長(zhǎng),或者比較方便地實(shí)現(xiàn)對(duì)其中一個(gè)(或幾個(gè))組分的精制。