熒光分光光度計的構(gòu)成

1. 光源：為氙弧燈，后者能發(fā)射出強度較大的連續(xù)光譜，且在300nm～400nm 范圍內(nèi)強度幾乎相等，故較常用。

2．激發(fā)單色器：置于光源和樣品室之間的為激發(fā)單色器或一單色器，篩選出特定的激發(fā)光譜。

3．發(fā)射單色器：置于樣品室和檢測器之間的為發(fā)射單色器或第二單色器，常采用光柵為單色器。篩選出特定的發(fā)射光譜。

4． 樣品室：通常由石英池(液體樣品用)或固體樣品架(粉末或片狀樣品)組成。測量液體時，光源與檢測器成直角安排；測量固體時，光源與檢測器成銳角安排。

5． 檢測器：一般用光電管或光電倍增管作檢測器?？蓪⒐庑盘柗糯蟛⑥D(zhuǎn)為電信號。

熒光光譜

物體經(jīng)過較短波長的光照，把能量儲存起來，然后緩慢放出較長波長的光，放出的這種光就叫熒光。如果把熒光的能量--波長關(guān)系圖作出來，那么這個關(guān)系圖就是熒光光譜。熒光光譜當(dāng)然要靠光譜檢測才能獲得。

熒光光譜。高強度激光能夠使吸收物質(zhì)中相當(dāng)數(shù)量的分子提升到激發(fā)態(tài)。因此極大地提高了熒光光譜的靈敏度。以激光為光源的熒光光譜適用于超低濃度樣品的檢測，例如用氮分子激光泵浦的可調(diào)染料激光器對熒光素鈉的單脈沖檢測限已達到10-10摩爾/升，比用普通光源得到的靈敏度提高了一個數(shù)量級。

熒光光譜有很多，如原子光譜1905年，Wood首先報道了用含有NaCl的火焰來激發(fā)盛有鈉蒸氣的玻璃管，并得到了D線的熒光，被Wood稱為共振熒光。在Mitchell及 Zemansky和Pringsheim的著作里討論了某些揮發(fā)性元素的原子熒光?；鹧嬷械脑訜晒鈩t是Nichols和Howes于1923年報道的，他們在Bunsen焰中做了Ca、Sr、Ba、Li及Na的原子熒光測定。從1956年開始，Alkenmade利用原子熒光效率和原子熒光輻射強度的測定方法，以及用于測量不同火焰中鈉D雙線共陣熒光效率的裝置，預(yù)言原子熒光可用于化學(xué)分析。 1964年，美國的Winefordner和Vickers提出并論證了原子熒光火焰光譜法可作為一種新的分析方法，同年，Winefordner等成功地用原子熒光光譜測定了Zn、Cd、Hg。有色散原子熒光儀和無色散原子熒光儀的商品化，極大動了原子熒光分析的應(yīng)用和發(fā)展，使其進入一個快速發(fā)展時期。

熒光分析的特點

靈敏度高：熒光分析的特點是靈敏度高，通常情況下要比分光光度計的靈敏度高出2-3個數(shù)量級。

選擇性強：包括激發(fā)光譜和發(fā)射光譜，在鑒定物質(zhì)時，通過選擇波長可以使分子熒光分析有多種選擇。

試樣量少和方法簡便。

能提供比較多的物理參數(shù)：如激發(fā)光譜、發(fā)射光譜、熒光強度、產(chǎn)率、熒光壽命、熒光偏振等參數(shù)。這些參數(shù)反映了分子的各種特性，并通過它們可以得到被檢測分子的更多信息。