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液相色譜儀在生物制藥中的應(yīng)用
液相色譜儀是近幾十年發(fā)展起來的一種、快速的分離分析技術(shù),是現(xiàn)代分離檢測(cè)的重要工具。液相色譜儀是以經(jīng)典液相色譜儀為基礎(chǔ),引入氣相色譜儀的理論和實(shí)驗(yàn)方法,將流動(dòng)相改為高壓輸送,采用固定相和在線檢測(cè)等手段,發(fā)展而成的分離分析技術(shù),具有高壓、高速、、高靈敏度、高選擇性和應(yīng)用范圍廣等特點(diǎn),成為生物制藥領(lǐng)域發(fā)展快、應(yīng)用的現(xiàn)代分析技術(shù)之一。
氣相色譜檢測(cè)器詳細(xì)介紹
檢測(cè)器基本原理: 從離子交換柱里下來的 帶有分離出來組分的載氣商品流通過檢測(cè)器而造成數(shù)據(jù)信號(hào),檢測(cè)器的輸入輸出數(shù)據(jù)信號(hào)歷經(jīng)轉(zhuǎn)換后變成色譜。
檢測(cè)器有幾種種類,但檢測(cè)器的作用全是一致的: 當(dāng)純的載氣(沒有待分離出來組分), 流過檢測(cè)器時(shí),造成平穩(wěn)的電子信號(hào)——基準(zhǔn)線 當(dāng)尚需分離出來組分根據(jù)檢測(cè)器時(shí) 造成差異的數(shù)據(jù)信號(hào) 氣象色譜儀檢測(cè)器類型多種多樣,有很多種歸類: ①依據(jù)對(duì)被檢驗(yàn)試品的回應(yīng)范疇能夠被分成: 通用性檢測(cè)器:對(duì)絕大部分檢驗(yàn)愚昧均有回應(yīng),如:TCD、PI。 挑選型檢測(cè)器:對(duì)某一類化學(xué)物質(zhì)有回應(yīng),對(duì)其它成分的無響應(yīng)或不大,如:FPD。 ②依據(jù)檢測(cè)器的檢驗(yàn)方法不一樣還可以分成: 濃度值型檢測(cè)器:測(cè)量的是載氣中某組分濃度值一瞬間的轉(zhuǎn)變,即檢測(cè)器的響應(yīng)值和組分的濃度值成正比,如TCD、PID。 化檢測(cè)器:測(cè)量載氣中某組分單位時(shí)間內(nèi)進(jìn)到檢測(cè)器的成分轉(zhuǎn)變,即檢測(cè)器的響應(yīng)值和單位時(shí)間內(nèi)進(jìn)到檢測(cè)器某組分的品質(zhì)成正比,如FID、FPD。
液相色譜儀與氣相色譜差別
液相色譜儀在基本概念上和氣相色譜器是一致的,因此 設(shè)施的基本基本原理類似,可是它們?cè)跈z查層面是有不一樣的地點(diǎn)的,有不一樣的,但又有不同點(diǎn):液相色譜 與氣相色譜的關(guān)鍵差別可歸結(jié)為于以下幾個(gè)方面:
1、氣相方法的不一樣:液相色譜儀只需將試樣做成水溶液,而氣相色譜需加溫汽化或裂化;
2、流動(dòng)相的不一樣,在被測(cè)組分與流動(dòng)相中間、流動(dòng)各相穩(wěn)定相中間都具有著一定的作用力;
3、因?yàn)槿芤旱酿ざ容^汽體大2個(gè)量級(jí),使被測(cè)組分在液態(tài)流動(dòng)看中的熱擴(kuò)散系數(shù)比在汽體流動(dòng)看中約小4~5個(gè)量級(jí);
4、因?yàn)榱鲃?dòng)相的成分可開展普遍挑選,并可配備成二元或多元化管理體系,達(dá)到梯度方向過柱的必須,因此增強(qiáng)了液相色譜的屏幕分辨率(柱效率);
5、液相色譜選用5~10Lm細(xì)顆粒物固定不動(dòng)相,使液體相在離子交換柱上透水性大大的變小,流動(dòng)摩擦阻力擴(kuò)大,務(wù)必依靠高壓水泵運(yùn)輸流動(dòng)相;
6、液相色譜儀是在液相中開展,對(duì)被測(cè)組分的檢驗(yàn),一般選用靈巧的濕式亮度檢測(cè)器,比如,紫外線度檢測(cè)器、示差折光率檢測(cè)器 、瑩光亮度檢測(cè)器等;