武漢紐斯特生物科技有限公司（WuhanNewEastBiotechonologyCo.Ltd），系美國生命科學(xué)試劑供應(yīng)商美國NewEastBio在中國的子公司。公司位于武漢東湖高新技術(shù)開發(fā)區(qū)光谷生物城.美國NewEastBio專注于生命科學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域，主要產(chǎn)品有小分子、ELISA試劑盒、蛋白等，與世界高校和研究所、世界大制藥公司、生物科技公司和醫(yī)院等客戶建立了長期穩(wěn)定的合作關(guān)系，產(chǎn)品銷往全球。

產(chǎn)品描述

    ARF6（ADP-核糖基化因子6）是ARF超家族的成員。 ARF基因編碼小的GTPases，它們會(huì)增加霍l亂毒l素的ADP-核糖基轉(zhuǎn)移酶活性，并且對于作為磷脂酶D的激l活劑的囊泡運(yùn)輸至關(guān)重要。Alf6調(diào)節(jié)膜運(yùn)輸并起吞噬作用的調(diào)節(jié)分子的作用。

測定步驟

I.主動(dòng)Arf 6下拉分析

1.將0.5 – 1 mL細(xì)胞裂解液等分到微量離心管中。

2.使用1X分析/裂解緩沖液將每個(gè)樣品的體積調(diào)整為1 mL。

3.在管中加入1 μl抗活性Arf 6單克l隆抗l體。

4.通過渦旋或滴定徹底重懸蛋白A / G瓊脂糖珠漿。

5.快速向每個(gè)管中添加20 μL重懸浮的珠漿。

6.輕輕攪拌將試管在4°C下孵育1小時(shí)。

7.通過以5,000 x g離心1分鐘來沉淀小珠。

8.吸出并丟棄上清液，確保不要干擾/除去珠粒。

9.用0.5 mL的1X Assay / Lysis Buffer洗滌磁珠3次，每次離心并吸出。

10.后一次洗滌后，將珠粒沉淀并小心除去所有上清液。

11.將磁珠沉淀重懸于20 μL 2X還原SDS-PAGE樣品緩沖液中。

12.將每個(gè)樣品煮沸5分鐘。

13.以5,000 x g的速度離心每個(gè)樣品10秒鐘。

武漢紐斯特生物科技有限公司（WuhanNewEastBiotechonologyCo.Ltd），系美國生命科學(xué)試劑供應(yīng)商美國NewEastBio在中國的子公司。公司位于武漢東湖高新技術(shù)開發(fā)區(qū)光谷生物城.美國NewEastBio專注于生命科學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域，主要產(chǎn)品有小分子、ELISA試劑盒、蛋白等，與世界高校和研究所、世界大制藥公司、生物科技公司和醫(yī)院等客戶建立了長期穩(wěn)定的合作關(guān)系，產(chǎn)品銷往全球。武漢紐斯特生物將攜手美國NewEastBio，負(fù)責(zé)美國品牌NewEastBio產(chǎn)品在中國市場的推廣、銷售及售后服務(wù)。

測定原理

NewEast Biosciences Rab35激l活檢測試劑盒基于特定于配置的抗Rab35 GTP

單克l隆抗l體，用于測量細(xì)胞提取物中或體外的活性Rab35 GTP水平

GTPγS加載Rab35激l活測定。 簡而言之，抗活性Rab35小鼠單克l隆抗l體將是

與含有Rab35-GTP的細(xì)胞裂解液一起孵育。 綁定的活動(dòng)Rab35隨后將被下拉

蛋白質(zhì)A / G瓊脂糖。 沉淀的活性Rab35將通過免l疫印跡分析使用

抗Rab35兔多克l隆抗l體。

Arl1激l活試驗(yàn)。純化的GST標(biāo)記的Arl1蛋白用抗活性Arl1單克l隆抗l體（Cat。#26924）用GDP（車道1）或GTPγS（車道2）處理后，用抗Arl1單克l隆抗l體（Cat）進(jìn)行印跡。#26056年）。顯示Arl1蛋白輸入控制在底部面板中。

Arf樣蛋白1（Arl1）是調(diào)節(jié)性gtpase家族中的一員，位于Ras中GTPases的超家族，在真核生物中具有高度保守的同源基因。Arl1至關(guān)重要用于果蠅和秀麗隱桿線蟲的早期胚胎發(fā)育。Arl1在一級序列，細(xì)胞位置和功能（膜交通的調(diào)節(jié)）到Arf1–6甚至共享幾個(gè)共同的有約束力的合作伙伴。除了在膜交通中的作用高爾基/跨高爾基網(wǎng)絡(luò)，有報(bào)道表明Arl1可能在離子穩(wěn)態(tài)中起作用酵母。

目前還沒有直接測定Arl1-gtpase活性的方法。NewEast Biosciences Arl1激l活檢測試劑盒是基于特定構(gòu)型的單克l隆抗l體特異性識(shí)別Arl1 GTP，但不識(shí)別Arl1 GDP的抗l體。鑒于單克l隆抗l體對其抗原，活化試驗(yàn)可在短時(shí)間內(nèi)進(jìn)行。這個(gè)分析結(jié)果可靠，重現(xiàn)性一致。