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核酸試劑盒
核酸檢測,是通過檢測病毒的遺傳物質(zhì)核酸而做出診斷,采用RNA逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)和PCR技術(shù),簡單說就是使用生物技術(shù)抓取病毒獨(dú)有的核酸基因片段,然后大量復(fù)印,把它們的特點(diǎn)放大,這樣就可以輕松檢測到病毒了。核酸檢測試劑盒的設(shè)計本身就是針對新型冠狀病毒特有的基因片段,并且還做了特異性驗(yàn)證,用試劑盒去檢測其他相似的病毒如SARS等,檢測結(jié)果均是陰性,只有檢測病毒時才是陽性,這就確保了試劑盒的特異性,從而不會誤診。
RPA的特性:快速檢測 15min進(jìn)行單分子檢測試驗(yàn), 簡易包裝 穩(wěn)定凍干形式試劑. 無需熱循環(huán)過程 擺脫任何儀器束縛. 便攜 設(shè)備要求低,貧瘠條件亦能 完成檢測
RPA能實(shí)現(xiàn)多重化嗎
可以。需要注意的是,RPA反應(yīng)的引物總量(nmol)不要超標(biāo)太多。如果在一個反應(yīng)中使用兩個以上的擴(kuò)增引物,就應(yīng)該控制不同引物的量。另外,我們應(yīng)當(dāng)事先考慮好檢測多個擴(kuò)增事件的探針、設(shè)備以及熒光團(tuán)的兼容性。
等溫核酸試劑盒
國內(nèi)核酸試劑企業(yè)快速跟進(jìn),以公開的病毒序列作為靶序列,開發(fā)針對這一病毒的試劑。截至發(fā)稿,動脈網(wǎng)從公開找到98款已經(jīng)完成開發(fā)的熒光PCR法SARS-CoV-2病毒的核酸檢測試劑盒,當(dāng)然還有很多在研產(chǎn)品和未公布產(chǎn)品信息的試劑盒沒有被統(tǒng)計在內(nèi)。
根據(jù)規(guī)定,核酸檢測試劑在疫情期間可以免臨床試驗(yàn)先上市,后補(bǔ)充臨床試驗(yàn)數(shù)據(jù),審批有效期為1年。核酸檢測試劑盒獲國家局審批上市后,即可進(jìn)入各地醫(yī)院和逐步開放的第三方醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)所進(jìn)行核酸檢測,對疾病預(yù)防控制中心的人群篩查工作形成有力補(bǔ)充。
數(shù)字PCR技術(shù)是第三代PCR技術(shù),是一種核酸分子定量的檢測方法?,F(xiàn)階段,核酸分子的定量有三種方法:光度法基于核酸分子的吸光度來定量;實(shí)時熒光定量PCR基于Ct值,即指可以檢測到熒光值對應(yīng)的循環(huán)數(shù);數(shù)字PCR作為新定量技術(shù),主要采用當(dāng)前分析化學(xué)熱門研究領(lǐng)域的微流控或微滴化方法,借助專門設(shè)備將50微升左右核酸溶液樣本大量稀釋后,分割成了近10萬個液滴分散至芯片的微反應(yīng)器或微滴中,單一液滴為獨(dú)立反應(yīng)單元,每個反應(yīng)器的核酸模板數(shù)少于或者等于1個。