【廣告】
離子緩沖劑,pKa (25°C)為7.40,緩沖范圍6.8~8.2。 因為其緩沖范圍恰好在生理條件下,因此成為許多生物學(xué)家青睞的緩沖
液。其常用實驗如下:
(1)細(xì)胞洗滌緩沖液;
(2)沉淀和提取DNA的溶液;
(3)用于通過凝膠過濾和親和層析純化來自豬的微粒體;
(4)用于酶測定緩沖液。
像大多數(shù)中性胺基緩沖液一一樣, TES可與DNA形成復(fù)合物; 其限制酶動力學(xué)的能力比HEPES強,但比Tris弱; TES與常見金 屬如Cr3 和
Fe3 形成強復(fù)合物,與Co2 , Ni2 , Cu2 和Zn2 形成弱復(fù)合物。TES適用于二喹啉甲酸(BCA) 測定。
三羥氨基,英文名Trome thamine或Trometamol,簡稱THAM,它是一種應(yīng)用非常廣泛的有機試劑,可用于制作、有機合
成、生物緩沖劑等。其中在生化實驗中,許多蛋白質(zhì)及核酸相關(guān)的實驗都需要用HAM作為生物緩沖劑。
THAM可由與或在催化劑下高壓反應(yīng),然后經(jīng)氮氣、氫氣轉(zhuǎn)換制得。THAM極 易溶于水,本身顯堿性,作為緩沖劑時通常需要配合酸一起使用, 比如THAM- HC1緩沖液就是比較常用的,除此之外還有許多其他的緩沖液體系。
Fe3 形成強復(fù)合物,與co2 , Ni2 , Cu2 和Zn2 形成弱復(fù)合物。TES適用于二喹啉甲酸(BCA) 測定。三(羥)甘胺酸,是常用于生物化學(xué)和分子生物學(xué)的離子緩沖劑。(1) Laemmli緩沖液代替甘氨酸來分離小分子肽;(2)用于動物組織培養(yǎng),并有助于抑制支原體的非預(yù)期生長;(3)被添加到細(xì)菌培養(yǎng)基中以防止鐵鹽沉淀;其25° c下的pKa為8. 05,緩沖范圍7. 48.8。應(yīng)用領(lǐng)域如下:
中由時期1地,)分0TA非常需要,目的是監(jiān)合M2 等離子,防止電封活M確。由于核酸鱗需更這些離子,EOn可以
將這些子牢抓住,避免核酸降解。但要注的是,鎂離子同時提很多醋素的斷因子,如限制騰、0u噪含酵等,因此的決度一般不會太高 (通常在1mM左右)。
Tris緩沖劑往往是搭配使用,在生化實驗或研究工作中要慎重地選擇緩沖體系,因為有時影響實驗結(jié)果的因素并不僅僅只有緩沖液的
pH值,而是緩沖液中的某種離子。