然后加入羊抗人IgM-HRP（辣根過氧化物酶）酶結(jié)合物，經(jīng)第二次孵育后，酶結(jié)合物就會與次孵育結(jié)合上的HEV IgM相結(jié)合，洗板除去未結(jié)合的酶結(jié)合物，加入TMB底物溶液，在第三次孵育時會發(fā)生酶-底物反應(yīng)，只有那些含有HEV IgM和酶結(jié)合物所形成的復(fù)合物的孔才會發(fā)生顏色變化，加入硫酸溶液終止酶和底物間的反應(yīng)



制備方法編輯包括以下步驟：1)抗原表位的計(jì)算機(jī)篩選；2)抗原的制備；3)的采集；4)間接ELISA方法的建立；5)間接ELISA方法的敏感性和特異性驗(yàn)證；6)試劑盒的穩(wěn)定性驗(yàn)證；7)對屠宰場進(jìn)行臨床檢測。該方法簡單、快速、靈敏度高、特異性強(qiáng)、穩(wěn)定性合格、重復(fù)性好。應(yīng)用本發(fā)明制得的試劑盒能有效檢出豬的戊型病毒，適用于大批量發(fā)病樣本的檢測，可用于豬戊肝的快速診斷，并預(yù)防、控制豬戊毒的流行和阻斷戊毒由豬向人傳播。



終止液（3M　H2SO4）：蒸餾水178.3ml，逐滴加入（98%）21.7ml。（5）　底物緩沖液（PH5.0磷酸棗檸檬酸）:0.2MNa2HPO4（28.4克/L）25.7ml0.1M檸檬酸（19.2克/L）　 24.3ml加蒸餾水50ml。（6）　TMB（四）使用液:TMB（10mg/5ml無水乙醇）0.5ml底物緩沖液（PH5.5）　 10ml0.75%H2O2　 　32μl（7）　ABTS使用液:ABTS　0.5mg底物緩沖液（PH5.5）　 1ml3%H2O2　 　2μl（8）　抗原、和酶標(biāo)記。（9）　正常人和陽性對照。