ELISA試劑盒的測(cè)定原理

測(cè)定技術(shù)的基礎(chǔ)在于抗原之間的特異結(jié)合反應(yīng)，所以任何的診斷劑離不開好的原料，如抗原，酶等。以前用于測(cè)定的抗原通常為各種純化抗原，而則為純化抗原動(dòng)物后獲得的多和使用雜交瘤技術(shù)得到的，而抗原或的標(biāo)記物如酶標(biāo)結(jié)合物則通過各種化學(xué)合成方法制備。近年來，隨著分子生物學(xué)的發(fā)展，使用基因工程方法制備各種特殊的抗原或及其酶結(jié)合物等測(cè)定試劑幾成為現(xiàn)實(shí)的新一代試劑，各種新型使用的測(cè)定方法也不斷出現(xiàn)。

ELISA試劑盒——ELISA實(shí)驗(yàn)通用規(guī)則

1、溫浴時(shí)，要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板，防止水分的蒸發(fā)。

Elisa試劑盒的操作注意事項(xiàng)

洗刷是ELISA試劑盒操作過程中決議實(shí)驗(yàn)勝敗的一個(gè)關(guān)鍵步驟。目的是除掉未結(jié)合的反響物，間斷抗原抗體反響，除掉標(biāo)本中與反響無關(guān)的成分、游離的酶標(biāo)物以及反響過程中吸附于固相載體上的非特異性物質(zhì)。

斷定效果須運(yùn)用Elisa試劑盒測(cè)讀儀，比色法判讀可選擇單波長(zhǎng)或雙波長(zhǎng)，根據(jù)反響液顏色的不同選用不同波長(zhǎng)的濾光片，以空白孔校零測(cè)定反響孔的吸光度值。具有杰出的重復(fù)性。

Elisa試劑盒操作注意事項(xiàng)

1．Elisa試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

2．濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。

3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。

4．請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值），請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。

5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．底物請(qǐng)避光保存。

7．嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以讀數(shù)為準(zhǔn).

8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按污染物處理。

9．本試劑不同批號(hào)組分不得混用。

10. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準(zhǔn)。